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- 保存条件:
冷藏
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长期
- 库存:
324
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
20次
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括双色预染宽分子量蛋白Marker(10-170KD)哪里卖在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
双色预染宽分子量蛋白Marker(10-170KD)哪里卖
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:RFT052
规格:20次
● 储存条件:-20℃保存,开封后有效期12个月
● 产品简介:
本产品包含10种纯化的预染蛋白质组成,分子量范围为10kD-170kD,其中70kD条带为红色,10kD条带为绿色,其余条带为蓝色,可以用于SDS-PAGE和Western Blot转膜时确定未知蛋白的分子量。
● 使用说明:a 第一次收到该产品,室温融化后,彻底混匀,离心快甩将溶液完全收集到管底,根据需要适量分装成小管,-20℃贮存,每次取一小管使用。
b-20℃取一管样品,彻底融化,上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。一般说来,0.75mm×5mm(厚度×宽度)的加样孔上样5μl,其他规格梳子请适当调整上样量。
c 电泳结束后,可以直接在胶上观察结果。
d 预染蛋白Marker在不同的凝胶系统中迁移率会有不同,因此只能用来粗略估计目的蛋白的大小。如要精确确定蛋白的大小,请在同一凝胶系统中用非预染蛋白Marker来标定预染蛋白Marker的分子量。
更多有关双色预染宽分子量蛋白Marker(10-170KD)哪里卖的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销售以下产品:
·100bp DNA ladder(100-1500bp)
编号:RFT001
规格:100次
● 产品简介:
本产品是由11条带状双链DNA组成,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。本产品为即用型产品,已含有1×loading buffer,可根据实验需要,直接取2-5μl电泳,使用方便,电泳图像清晰。 本产品中11条带为100,200,300,400,500,600,700,800,900,1000,1500bp,其中500bp条带为100ng/5μl,其余条带浓度为50ng/5μl。
● 储存条件:4℃ 贮存6个月,-20℃贮存 1年。
● 使用方法:1.取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中(每1mm×1mm加样孔加1μl,如果加样孔宽于5mm,可以适当增加上样量)进行电泳。
2.建议电泳条件:凝胶浓度为1.0%,凝胶长度8-10cm,电泳电压4-10v/cm,电泳时间30-35分钟。
3.通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注:如果使用Goldview等染料就行染色,由于灵敏度比EB低,请酌情增加Marker的上样量。
● 注意事项:1.琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响,电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2.请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳,以保证Marker良好的分离效果。
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ARB13873 猪白介素1β(IL-1β)血清中含量检测 Porcine interleukin 1β,IL-1β ELISA KIT
J0208 兔抗乙肝表面抗原抗血清
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BL1226 Hanks,含钙镁,不含酚红(HBSS)
皂土 Allantoin 1302-78-9
2-羟基-4’-甲氧基二苯甲酮 Amberlite XAD7HP 131-57-7
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HC0260 Eppendorf连续多档加样器
BL1320 4×dNTPs(100mM)
双色预染宽分子量蛋白Marker(10-170KD)哪里卖关键词:双色预染宽分子量蛋白Marker,RFT052,10-170KD
·10×RealBlot快速转膜液
编号:RFT081
规格:500ml
● 产品简介:
快速转膜液使用独特配方,能高效快速地将蛋白转移到印迹膜(PVDF或硝纤膜)上。使用湿转法(Tank blot)或半干转法(Semi-dry blot)方法,能在15-35分钟内完成转膜过程。
快速和环保:快速转膜液不使用甲醇,减轻了对实验者和环境的伤害。
兼容性好:快速转膜液能兼容Laemmli胶,预制胶,Bis-Tris胶等多种凝胶。
转移效率高:快速转膜液对分子量跨度较大的蛋白也有很好的转移效率,有效解决了大小蛋白不能在同一张膜上同时转移的问题。
● 贮存: 18-26℃常温贮存,有效期一年。
● 使用说明:转膜前的准备:5-6张裁好的滤纸;裁好的转印膜;足够的1×快速转移buffer
一 湿转法(Tank blot):1 按照下表配制1×快速转膜液
1×快速转膜液配制量
100 ml 500 ml 1000 ml
10×快速转膜液 10 ml 50 ml 100 ml
无水乙醇 20 ml 100 ml 200 ml
超纯水 70 ml 350 ml 700 ml
2 将滤纸和海绵浸泡在1×快速转膜液中,完全浸湿。
3 将凝胶在超纯水中浸泡漂洗2分钟,去除胶表面的SDS;随后将凝胶浸泡在1×快速转膜液中。
注意:水中漂洗时间一定不能超过2分钟,否则分子量较大的蛋白不能完全转移。
4 按照以下顺序做好转印三明治结构:负极(阴极)
一块海绵
2mm滤纸
凝胶
转印膜
1mm滤纸
一块海绵(根据三明治的厚度选择是否使用)
正极(阳极)
注意: ① 要彻底清除三明治结构中的气泡,适当补加1×快速转膜液保持三明治结构湿润。
② PVDF膜使用前要用无水甲醇润湿30秒。
③ 三明治结构的制作不能太紧,也不能太松。太紧和太松都会影响转印效果。如果太紧的话,可以去除阳极一侧的海绵或滤纸。
5 将三明治结构放于转移槽中。
注:转移槽中可以不用1×快速转膜液,可以用1×TGS(Tris-Glycine-SDS)电泳缓冲液取代。三明治结构中的快速转膜液足够保证转膜的完成。
二 半干转(Semi-dry blot):1 按照下表配制1×快速转膜液:1×快速转膜液配制量
100 ml 500 ml 1000 ml
10×快速转膜液 10 ml 50 ml 100 ml
无水乙醇 20 ml 100 ml 200 ml
超纯水 70 ml 350 ml 700 ml
2 将滤纸浸泡在1×快速转膜液中,完全浸湿。
3 将凝胶在超纯水中浸泡漂洗2分钟,去除胶表面的SDS;随后将凝胶浸泡在1×快速转膜液中。
注意:水中漂洗时间一定不能超过2分钟,否则分子量较大的蛋白不能完全转移。
4 按照以下顺序做好转印三明治结构:负极(阴极)
下层滤纸
凝胶
转印膜
上层滤纸
正极(阳极)
半干转时,滤纸、胶、膜之间的大小,一般是下层滤纸>=膜>=胶>=上层滤纸。上下两层的滤纸一定不能接触;滤纸、胶、膜之间千万不能有气泡。接触的滤纸和气泡会造成短路。
注意:PVDF膜使用前要用无水甲醇润湿30秒。
我公司正在优惠促销蛋白质研究等系列产品,期待您的咨询选购双色预染宽分子量蛋白Marker(10-170KD)哪里卖。
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文献和实验蛋白质印迹(Western blotting)方法原理和优化
或重组的纯化蛋白混合物组成。在凝胶或膜上显示其位置需要染色步骤。预染标准允许在电泳过程中监测蛋白分离,也可以在随后的印迹步骤中指示转移效率。然而,它们比较昂贵且加入染料会影响蛋白迁移率。预染标准在确定分子量时可能 不够精确,并且蛋白质上附加的染料在转移时会影响它们吸附到膜上的能力。 聚丙烯酰胺浓度 凝胶中聚丙烯酰胺浓度可以是均一浓度或是梯度浓度。最常见的聚丙烯酰胺浓度为10%,最适合分离10-150KD范围内的蛋白质。若要分析未知蛋白或许要更宽的分离范围,推荐使用梯度
其实也有很大范围的调整 ,并不是非要固定于哪一个最合适,曾经做过 一张膜转,17 KD的和170 KD的,按照170 KD的条件,17 KD的转膜也很好的。 蛋白来源:人非小细胞肺癌细胞系 蛋白名称(可保密):保密 蛋白分子量:大于250 kD WB用膜类型、孔径
电泳过程同样很重要啊。电转的时候其实只要预染marker只要转到膜上了,那么你的相应分子量的目的蛋白也就转过去了,所以这就是你摸索条件的指示带。3、电泳过程中有推荐TRICINE-SDS-PAGE胶来进行电泳,会更有利于小分子量蛋白的分离,研读了一些文献,这个效果应该还是很肯定的,但是鄙人没有做过这种电泳,所以给不了什么经验,我最终还是用普通SDS-PAGE胶做出来的,不过鉴于我的蛋白分子量是11KD,那么假如你是几KD甚至更小分子量的多肽,那么还是建议你用TRICINE-SDS-PAGE胶来电
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