186001315美国沃特世Atlantis dc18 Se

利用CORTECS实心核颗粒色谱柱进行HPLC梯度方法转换

Jonathan E. Turner, Bonnie A. Alden, Mia Summers, Kenneth Berthelette 和Kenneth J. Fountain 沃特世公司(美国马萨诸塞州米尔福德) 简介 将使用填充了大颗粒的大体积色谱柱的HPLC梯度方法转换至填充高效CORTECS 2.7 µm颗粒的小体积色谱柱，可轻松缩短分析时间、节省溶剂与样品消耗量，最终节约成本。在转换HPLC梯度方法时，可通过适当调整方法条件和选择相当的色谱柱填料来避免对色谱

蛋白纯化反相柱的选择

子 的分析分离，对于蛋白这样的大分子，要用300A孔径的填料，可以避免分子扩散到填料内部的摩擦阻力，提高柱效。此外C载量来说，蛋白柱和一般的C18也是不一样的。 Agilent, Waters，Vydac都有相关的成熟产品，最好能配备相应的保护柱。 更小内径的柱子可以节省流动相，有些更适于甲酸等液质连用的情况。 制备的话，还是考虑聚合物的制备级填料Source RPC比较好，可以NaOH CIP。Amersham也有ReSource的聚合物反相分析柱卖，寿命会长些，该柱非极性与C8相近

高效液相色谱柱

时间，另外，可以采用低粘度的溶剂做流动相或增加色谱柱的使用温度，比如用乙腈代替甲醇，以降低色谱柱的压力。三、如何保证良好的柱性能与柱寿命 ◆ 认证阅读色谱柱使用说明书； ◆ 使用填充良好的色谱柱； ◆ 尽量减少压力波动，避免机械及热冲击； ◆ 使用保护柱及在线过滤器； ◆ 经常以强溶剂冲洗色谱柱； ◆ 充分过滤样品及流动相，尽量避免杂质微粒与强保留成分； ◆ 用稳定的固定相（C18最稳定）； ◆ 在中等pH值操作（6～8），用有机缓冲溶液； ◆ 色谱柱使用温度最好小于40℃