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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 供应商:
上海莼试
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 细胞类型:
A类
- ATCC Number:
详见说明书
- 品系:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 细胞形态:
淋巴母细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
详见说明书
- 器官来源:
小鼠杂交瘤细胞
- 运输方式:
干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
- 年限:
详见说明书
- 生长状态:
半贴壁生长
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;D11E8A1G5
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 可产生单克隆抗体。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes)10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
小鼠杂交瘤细胞;D11E8A1G5操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
Kuromaninchloride矢车菊苷20次/240ug/支BR,99% 人 KSR2 基因全长ORF克隆
R-苯甘氨醇,英文名或英文缩写:D-Phenylglycinol,级别:BR,98%,规格:1克 人 KYNU / Kynureninase 基因全长ORF克隆
Iron(III)oxide三氧化二铁100克CP,98% 小鼠 KYNU / Kynureninase 基因全长ORF克隆
N-叔丁氧羰基-D-苯丙氨酸,英文名或英文缩写:BOC-D-Phenylalanine,级别:BR,99%,规格:25克 人 CD171 / NCAM-L1 转录变体2 基因全长ORF克隆
INTSubstratesolutionBCIP5毫克CP,98% 小鼠 L1CAM 基因全长ORF克隆
N-苄氧羰基-L-脯氨酸,英文名或英文缩写:N-CBZ-L-Proline,级别:特纯,99%,规格:25克 小鼠 L1CAM 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带HA标签
INAH异烟酰5克AR,99.5% 人 L2HGDH 基因全长ORF克隆
N-叔丁芴甲氧羰基-L-脯氨酸,英文名或英文缩写:Fmoc-Pro-OH,级别:特纯,99%,规格:25克 人 L3MBTL2 基因全长ORF克隆
Hydantoin4-咪唑啉二酮25毫克AR 人 L3MBTL3 基因全长ORF克隆
(2R,3S)-2-氨基-3-甲基戊酸,英文名或英文缩写:D-allo-Isoleucine,级别:BR,98%,规格:25克 人 L3MBTL4 基因全长ORF克隆
H-Lys-OEt•2HClL-赖氨酸乙酯25克特纯,98.0% 人 LACRT 基因全长ORF克隆
N,N'-琥珀酰亚基碳酸酯,英文名或英文缩写:DSC,级别:高纯,98.5%,规格:10克 大鼠 LAG3 基因全长ORF克隆
H-Glu(OEt)-OEt•HClL-谷氨酸二乙酯盐酸盐5克特纯,98.0% 人 LAIR1 基因全长ORF克隆
菠萝酶,英文名或英文缩写:Bromelaine,级别:BR,50u/mg,规格:5克 大鼠 LAIR1 基因全长ORF克隆
HDBAC苯扎氯25克IND 人 LAIR2 基因全长ORF克隆
1,4-β-D-葡聚糖葡糖苷水解酶,英文名或英文缩写:Cellulase(Trichoderma Vride G),级别:USP级,1:3000,规格:5克 人 LALBA 基因全长ORF克隆
Guanidinecaonate碳酸亚氨脲500克CP,99% 人 LAMA4 基因全长ORF克隆
嶙酸葡萄糖异构酶,英文名或英文缩写:Phosphoglucose isomerase,级别:重组体,125u/mg,酵母,规格:5克 小鼠 Lamb1 基因全长ORF克隆
Gly-Gly-Len甘氨酰-甘氨酰-L-亮氨酸1克BR,98% 人 LAMP-1 / CD107a / LAMP1 基因全长ORF克隆
烟酰腺嘌呤二核苷酸嶙酸四钠盐,英文名或英文缩写:TPNH2 Na4,级别:BR,2-5 u/ul,规格:100克 大鼠 LAMP1 基因全长ORF克隆
Glutaraldehyde1,5-戊二醛1克BR,98% 人 LAMP2 基因全长ORF克隆
T4DNA连接酶,英文名或英文缩写:T4 DNA Ligase,级别:层析纯,30u/mg,规格:100克 小鼠 LAMP2 基因全长ORF克隆
Germanium锗25克AR,99.5% 食蟹猴 LAMP2 基因全长ORF克隆
复合酶稳定剂AES,英文名或英文缩写:Enzyme Stabilizer AES,级别:BR,98%,规格:1公斤 大鼠 LAMP2 基因全长ORF克隆
Furazolidone痢特灵1克BR 人 CD208 基因全长ORF克隆
脲酸酶,英文名或英文缩写:UAO,级别:BR,40-300u/mg,牛血浆,规格:1克 小鼠 LAMP3 基因全长ORF克隆
Fmoc-Gly-OHFmoc-甘氨酸10克特纯,98% 食蟹猴 LAMP3 基因全长ORF克隆
蔗糖嶙酸化酶,英文名或英文缩写:Sucrose Phosphorylase,级别:超纯,99%,规格:5克 大鼠 LAMTOR1 基因全长ORF克隆
Fluoresceindichloride2ˊ,7ˊ-二氯荧光素1公斤BR,油溶,10% 人 LANCL1 基因全长ORF克隆
差向异构酶,英文名或英文缩写:Mutarotase,级别:BR,2500u/mg,规格:500毫克 人 LANCL2 基因全长ORF克隆
FDP1,6-二嶙酸果糖三钠盐1KU超纯,99% 人 LAP3 基因全长ORF克隆
亲和小鼠杂交瘤细胞;D11E8A1G5素,英文名或英文缩写:Avidin(chiken egg white),级别:BR,0.1u/mg,规格:25克 大鼠 LAPTM5 基因全长ORF克隆
Europium(III)oxide三氧化二铕1克AR 人 LASP1 基因全长ORF克隆
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文献和实验的标记角上,戴手套排除所有气泡。切记:为避免发生短路,不要切去凝胶的左下角。 c.把硝酸纤维素滤膜放在聚丙烯酰胺凝胶上,要保证精确对齐,而且在硝酸纤维素滤膜与聚丙烯酰胺凝胶之间并不留有气泡。 e. 把最后3张3滤纸放在硝酸纤维素滤膜上方,同样须确保备层精确对齐并不留气泡。 6)将靠上方的电极(阳极)放于夹层物上,连接电源。根据凝胶面积按300mA接通电流,电转移0.5-1.0小时。 7)断开电源并拔下槽上插头,从上到下拆卸转移装置,逐一掀去各层。将凝胶转移至盛有考马斯亮蓝染液的托盘中,进行
【资源】蛋白质的检测与分析——Western blot 操作步骤
免疫试剂,价格颇为低廉,所以可大大节约时间和金钱。 1.用抗靶蛋白的第一抗体与硝酸纤维素滤膜共温育的方法 1)在装有用上页所述方法处理过的硝酸纤维素滤膜的塑料袋中,按每平方厘米0.1ml的量加人封闭液和适量的第一抗体。 应进行预实验并按实际情况确定第一抗体的加量,推荐使用以下稀释度: a. 多克隆抗体:1:100-1:5000。 b. 杂交瘤细胞培养上清液:不稀释一1:100。 c. 杂交瘤小鼠的腹水:1:1000—1:10,000。 2)尽可能排除藏匿的气泡后密封袋口,将臆膜平
预实验并按实际情况确定第一抗体的加量,推荐使用以下稀释度: a.多克隆抗体:1:100-1:5000。 b.杂交瘤细胞培养上清液:不稀释一1:100。 c.杂交瘤小鼠的腹水:1:1000―1:10,000。 2)尽可能排除藏匿的气泡后密封袋口,将臆膜平放在乎缓摇动的摇床平台上,于37℃温育1~2小时。 3)剪开塑料袋,废弃封闭液和抗体,用25ml PBS漂洗滤膜3次,每次10分钟。 4)按下面介绍的方法,立即用二级免疫试剂与滤膜一同温育。 2.用二级免疫试剂与硝酸纤维素膜温育的方法
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