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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1000
- 供应商:
南京森贝伽生物科技有限公司
- 检测范围:
电询
- 检测方法:
酶联免疫
- 应用:
仅供科研使用
- 标记物:
人
- 样本:
血清、血浆、细胞及相关液体
- 规格:
96T、48T
人溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA试剂盒免费代测实验原理:
人溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA试剂盒免费代测用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本的存在与否。
人溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA试剂盒免费代测产品介绍:
货号:SBJ-H1546
规格:96T、48T
库存状态:现货供应
保存:2-8℃,避光保存
适用范围:仅供科研使用,不得用于临床
运输方式:快递(南京客户免费送货上门)
人溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA试剂盒免费代测操作步骤:
1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A 50μl,再加入显色剂B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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文献和实验上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 人 溴脱氧核苷尿嘧啶 ( BrdU )ELISA 试剂盒 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 BrdU 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 BrdU与单抗结合,加入生物素化的抗人 BrdU ,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的 Streptavidin
染色,导致染色弥散,准确性降低等问题。哈佛大学医学院细胞生物学家Adrian Salic就认为:“为了能够暴露BrdU的抗原表位,必须用高浓度的盐酸,乙酸或酶解,但经历了如此严重的处理后,细胞原本精巧细致的结构在显微镜下就变得惨不忍睹了。” 事实上,现在有一种新的检测方法能避免这种情况的发生----EdU检测。EdU (5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷)也是一种胸腺嘧啶核苷类似物,但其连有的炔羟基团在天然化合物中很少见,在细胞增殖时能够插入正在复制的DNA分子中,基于EdU与染料的共轭反应
处(包括双链 DNA 断裂位点)的募集过程。采集的图像不仅帮助我们确定募集到断裂位点修复蛋白的动力学信息和聚集水平,还验证了内源转录调节因子和 DDR 通路因子在 DNA 断裂位点的共定位。 图 1:实验方案示意图 将 MRE11 cDNA 克隆到带有 GFP 标签的表达载体中,然后将其转染到 U2OS 细胞。在使用溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)或 Hoechst 进行标记后,使用 FV3000 共聚焦显微镜的 405 nm 激光对核内目标区域(ROI)进行线扫描诱导 DNA 损伤。随后使用
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