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- 2025年12月19日
- 抗体纯化、免疫沉淀等
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- 详细信息
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- 文献和实验
- 技术资料
- 抗体英文名：
KANEKA KanCapA™
- 应用范围：
抗体纯化、免疫沉淀等
- 克隆性：
多克隆
- 保存条件：
2-10℃
- 规格：
2 ml(Net 1 ml)
新标准 抗体纯化树脂
KANEKA KanCapA™
本产品为Protein A亲和层析树脂。用于从活体样本及细胞培养上清纯化免疫球蛋白及包含Fc段的重组抗体。
本产品由高交联纤维素微珠及新研发的耐碱Protein A配体构成，可用于IgG的亲和纯化。
◆特点
• 耐碱
• 洗脱条件进一步优化
• 高抗体结合能力
• 可循环使用
• 便于扩增
◆关于改良Protein A
KanCapA™采用的不是天然Protein A，而是使用变异型C域5聚物的新型Protein A。
天然Protein A的C域结合于Fc段，也结合于Fab段，其中与VH3亚家族抗体的反应性较高。该类型的解离需要弱酸条件下洗脱。
为改善该问题，使用分子设计系统重新设计分子，研发了保持耐碱性、改善Fab段的非特异性结合及洗脱曲线的Protein A。
本产品采用的Protein A
| 1.C5聚体蛋白质 |
 |
最佳pH条件下清晰地洗脱抗体 |
| 2.较高的耐碱性 |
||
| 3.减少Fab段的非特异性结合 |
◆产品特性
KANEKA KanCapA™ 产品特性
| 矩阵 |
高交联纤维 |
※ 1) 平均粒度为累积体积分布的中间粒度 2) 5%动态结合容量为前端分析测定（停留时间3分钟） 3) 可在强碱条件下清洗，但请避免长时间的清洗 4) 请勿冷冻 |
| 平均粒度1) |
65-85μm |
|
| 配体 |
Protein A，重组(抗强碱) |
|
| 结合 |
化学结合（还原胺化） |
|
| 动态结合容量2) |
≧35mg 人多克隆IgG／mL载体 |
|
| 化学稳定性3) |
使用亲和层析通用可溶性溶媒时较稳定 |
|
| pH范围3) |
pH 2-13 |
|
| 静止清洗条件3) |
0.1-0.5 mol/L NaOH |
|
| 流量 |
最大500cm/h（层高: 20-25cm） |
|
| 停留时间 |
≧3分钟（建议：4-6分钟） |
|
| 保存条件4) |
20%乙醇浑浊液，1～10℃ |
◆应用
1、Fab段 纯化应用
• 利用KANEKA KanCapA™的特点，可从经木瓜蛋白酶处理后的IgG溶液分馏Fc段及Fab段。
2、IgG洗脱曲线（pH3.5 & pH3.0）
• 洗脱范围已优化，可清晰地分馏提纯。
3、通过强碱清洗进行树脂循环
• 进行300次循环处理后（0.1M NaOH溶液 15分钟），IgG的结合容量的减少率仍低于20%，表明其循环性能较高。
| 使用0.1 M NAOH溶液进行循环处理后的IgG结合活性曲线数据 |
循环处理后（0.1M NaOH溶液 15分钟）的IgG回收率及ProteinA配体的渗滤量的曲线数据 |
4、动态结合容量 曲线数据
• 在4-6分钟停留时间过程中，DBC较高。
※ 动态结合容量表示纯化样本在流动的状态下，回收程度的数值。动态结合容量较高的载体的流速较快，可回收大量目标分子，因此可以认为在短时间内有效纯化目标分子的优质载体。
KANEKA KanCapA™的Dynamic Binding Capacity (DBC; 动态结合容量) 曲线数据
5、不同大小的树脂填充装柱的压力/流速绘图数据
填充依赖压力的计算方法是从整体压力减去系统压力。
6、KANEKA KanCapA™ 于各种大小的柱的填充效果
• KANEKA KanCapA™适用于各种大小的柱。
| 充填方法 |
L. D.(cm) |
高度(mm) |
培养皿/m |
非对称性 |
| 流动填充 |
4.4 |
200 |
5710 |
1.14 |
| 轴向力填充 |
7 |
199 |
6063 |
1.06 |
| 流动填充 |
10 |
201 |
5276 |
1.18 |
| 流动填充 |
30 |
200 |
5208 |
1.17 |
| 轴向力填充 |
45 |
233 |
4712 |
1.09 |
以下是脉冲注入数据：
可溶性溶媒：1(v/v)% Acetone
注入量：1% 柱容量
流速：60 cm/h
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