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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1000
- 供应商:
南京森贝伽生物科技有限公司
- 检测范围:
电询
- 检测方法:
酶联免疫
- 应用:
仅供科研使用
- 标记物:
大鼠
- 样本:
血清、血浆、细胞及相关液体
- 规格:
96T、48T
大鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒厂家实验原理:
大鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒厂家用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本的存在与否。
大鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒厂家产品介绍:
货号:SBJ-R0382
规格:96T、48T
库存状态:现货供应
保存:2-8℃,避光保存
适用范围:仅供科研使用,不得用于临床
运输方式:快递(南京客户免费送货上门)
大鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒厂家操作步骤:
1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A 50μl,再加入显色剂B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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文献和实验内源性干扰因素一般包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体、因使用鼠抗体治疗或诊断诱导的抗鼠Ig抗体、交叉反应物质等。在日常的临床血清(浆)标本中,有相当比例不同程度的含有上述各种干扰物质,从而导致测定结果的假阳性。 1.类风湿因子(rheumatoid factors,RF)在类风湿患者、其他疾病以及正常人血清中,常含有较高或不同浓度的RF,RF一般为TgM型,亦有IgG和IgA型,RF具有与变性IgG产生非特异结合的特点,因为在ELISA测定中
++中等阳性,提示可能存在相关疾病。 1:3200+++强阳性,高度提示存在相关疾病。 1:10000++++很强的阳性,高度提示存在相关疾病。 3.自身抗体检测方法对结果的影响 不同的检测方法对实验结果有一定影响,如抗dsDNA抗体检测常用的方法有ELISA、放射免疫分析法和间接免疫荧光法(IIF)。这三种方法所能检测的抗体的亲和力差别很大,放射免疫法的特异性最高,IIF次之,ELISA较差。因此ELISA检出抗dsDNA阳性时,应用其它方法确认。
的阳性,高度提示存在相关疾病。 3.自身抗体检测方法对结果的影响不同的检测方法对实验结果有一定影响,如抗dsDNA抗体检测常用的方法有ELISA、放射免疫分析法和间接免疫荧光法(IIF)。这三种方法所能检测的抗体的亲和力差别很大,放射免疫法的特异性最高,IIF次之,ELISA较差。因此ELISA检出抗dsDNA阳性时,应用其它方法确认。 4.自身抗体流行病学资料的积累在IIF检测时,很多荧光模型相对应的靶抗原尚不清楚,且这些荧光模型的临床意义不明确。随着对自身免疫性疾病及其相关
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