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上海远慕生物科技有限公司
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20μl
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文献和实验的比较。反应:抗GAPDH单抗(clone 6C5)能够与鱼、蛙、鸡、兔、小鼠、大鼠及人组织来源的GAPDH反应,但不能与酵母GAPDH反应。一般我们选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上。actin即肌动蛋白,是细胞的一种重要骨架蛋白。actin大致可分为六种,其中四种是不同肌肉组织特异性的,这些不同的亚型组织分布是不一样的,在肌肉组织中的beta-actin分布就很少,心肌主要是alpha-cardiac muscle actin。因此不同的组织本来就应该选择不同的内参,不能一概
?✦ 简易标记法只要在二抗孵育时加入 HRP 标记内参抗体,按照正常操作即可。✦ Stripping 和 Reprobing确定内参表达的常用方法是 Stripping 和 Reprobing。先进行目的蛋白的抗体孵育显色和检测。然后使用 Strip 缓冲液洗掉膜上的抗体,再用内参特异性抗体重新检测。在 Strip 之后,为了确认完全的抗体去除,膜应洗涤、封闭,然后用二抗染色。如果 Strip 完成,二抗将不产生检测信号。如果检测到信号,则必须优化 Strip 条件。✦ 剪膜实验当目的蛋白的分子量
【资源】Western Blot为什么必须要用内参? -Western-生物通
,性能稳定、质量可靠、易于保存。 在Western Blotting实验过程中,由于使用的二级抗体往往会与总蛋白中本身含有的某些免疫球蛋白产生反应产生较强信号的杂带。因此,***生物工程有限公司推出了HRP标记的GAPDH,在任何情况下使用它都能够得到单一的条带结果,使得内参的使用方法更为简便准确。这种操作省时,无需二级抗体反应的HRP标记的GAPDH内参不仅具备***普通GAPDH的所有优点而且结果条带单一,可避免二级抗体的非特异性反应。售价为1498元人民币100μl,稀释比达1:10000
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