D-荧光素钾盐（超纯）(D-Luciferin, Potas

D-荧光素钾盐（超纯）(D-Luciferin, Potassium Salt)

产品描述
　　D-Luciferin Free acid, potassium salt, and sodium salt *UltraPure Grade*D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍用于整个生物技术领域，特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性（见下图）。将携带荧光素酶编码基因（Luc）的质粒转染入细胞后，导入研究动物如大小鼠体内，之后注入荧光素，通过生物发光成像技术（BLI）来检测光强度变化，从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响，根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

　　D-荧光素也常用于体外研究，包括荧光素酶和ATP水平分析；报告基因分析；高通量测序和各种污染检测。目前市场上有三种产品形式，D-荧光素（游离酸），D-荧光素钠盐，以及D-荧光素钾盐。这三种产品主要的差别在于溶解特性上。D-荧光素（游离酸）水溶性以及缓冲体系的溶解性都很弱，除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇（10 mg/ml）和DMSO（50 mg/ml）。但钠盐和钾盐形式的D-荧光素能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中，使用方便，溶剂无毒性，特别适合体内实验。配成液体后的这三种产品，在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。
订购信息

产品性质

保存方法
蓝冰运输，-20℃保存。有效期24个月。
使用方法
1.体外生物发光检测
（1）用蒸馏水溶解D-荧光素钾盐，配制成100 mM的储存液（200×，浓度30 mg/mL）。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存，避免反复冻融。
（2）用预热好的组织培养基1:200稀释储存液，配制工作液（终浓度150 µg/mL）。
（3）去除培养细胞的培养基直至无残留。
（4）待图像分析前，向细胞内添加1×荧光素工作液，然后进行图像分析（或者细胞放在37℃短时间孵育后检测可增强信号）。
2. 活体成像分析
（1）用无菌的DPBS（w/o Mg2+）配制D-荧光素钾盐工作液（15 mg/mL），0.2 μm 滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存，避免反复冻融。一旦使用，放到4℃解冻，保持冰冷且避光。
（2）注射量取决于注射方式，具体如下：

（3）注射入体内10~20 min（待光信号达到最强稳定平台期），再进行成像分析。
【注】：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定最高信号检测时间和信号平台期。
注意事项
1.本品（firefly luciferin）和甲虫荧光素（beetle luciferin）都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl) -2-thiazoline-4-carboxylic acid，仅仅是不同公司在命名上的差异。
2.本品保存和操作的过程中都要避光。另外水溶性储存液过滤除菌后，可以-20℃或-80℃分装冻存，避免反复冻融。如果有条件，对储存液充氮气或氩气（防止氧化），稳定性和保存时间更长，长达1年。
3.注射方式，动物类型以及体重等都会影响信号的发射，因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线，确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。
4.荧光素钾盐和荧光素钠盐应用上没有差别，两者的差别在于物理性状上如外形和溶解性。钠盐的水溶性高于钾盐。从目前发表的文献来看，钾盐的使用率远高于钠盐，尤其是体内实验，两者功效相同。
5.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作