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文献和实验. Polybrene (sigma)，10 mg/ml； 11. 透析袋：Spectrum Co. （成卷供应，带少量甘油，硫化物与重金属），MW=8000~14400； 12. 灭菌甘油。 三、操作流程： 1. 293 细胞（E1-transformed human embryonic kidney cells 在转染前24 小时接种于1 或2 个60 mm 培养盘中，使之在转染时细胞汇合率为50-70%； 2. 在转染前，用Pac I 处理目的质粒（一般一个60 mm 细胞盘
cvn：请大家分析下我的问题：本人用六孔板共转染（pAAV-IRES-hrGFP、pRC、phelper）包装空载体腺相关病毒，转染后48小时在荧光显微镜下看，一个视野内约有80%的绿色荧光。转染后第三天，收病毒。再将病毒原液感染种在六孔板内293细胞，48小时后在荧光显微镜下未见绿色荧光蛋白。上述的过程，本人重复了三次。均未见绿色荧光蛋白。现在本人感到疲惫。请大伙帮忙分析分析。谢谢！本人用脂质体2000转染，方法是：①转染前２４小时种板，②转染前一小时换液（用无血清的DMEM或有
FFPE 样本 FFPE 样本中的核酸在进⼊福尔马林浸泡之前就开始发⽣降解；样品基质内核酸易发⽣⽚段化、核苷酸碱基修饰以及核酸与蛋⽩的交联。 解决方案 1. 使用厚度不超过 5 mm 的组织样本，组织固定前的操作时间应当越短越好，避免 RNA 降解。 2. 不要过度固定（最多 24 h），固定时间越长，交联程度越⼤，样本中的 RNA 降解越厉害。 3. 推荐使⽤中性的福尔马林缓冲溶液及优质试剂进行石蜡包埋，不含添加剂。 4. 尽可能避免样品染色。 5. 可考虑使用专门的环保型脱蜡液，降低对实验环境
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