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文献和实验的羊抗鼠抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 透明质酸 (HA) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中 大鼠透明质酸 (HA) 的含量。 试剂盒组成 : 试剂盒组成 48 孔配置
2、每孔加入15μL 70%的乙醇预湿。 注意: (1)未润湿PVDF膜是洁白、不透明的,经乙醇润湿后,颜色变暗,呈半透明状,很容易观察二者的区别。 (2)加乙醇时,枪头应该靠在孔壁接近孔底的地方,注意枪头不要刺到PVDF膜。 (3)若加入的乙醇挂在孔壁上,盖上板盖,轻轻叩击,让乙醇顺势滑落。乙醇一旦接触到PVDF膜,就会在表面张力和毛细作用之下迅速浸润整块膜,使得膜的颜色和透明度发生变化。 (4)15μL是经过优化的体积,能保证
酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)是免疫酶一种,是一项先进的免疫化学测定技术。因其具有特异性高、敏感性强、结果易于检测,是饲料安全检测中某些违禁药品和添加剂,有害微生物的筛检和毒素的检测,是饲料安全检测中一项新的检测技术。 1 ELISA 的基本原理及方法类型 1.1 基本原理 EILSA主要是基于抗原或抗体能吸附至固相载体的表面并保持其免疫活性,抗原或抗体与酶形成的酶结合物仍保持其免疫活性和酶催化
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