Western blot二抗稀释液优惠促销

Western 实验步骤

BSA 蛋白标准液、BCA 试剂、PBS。 1) 标准曲线：用 BSA 和 PBS 混合总体积为 20 μL 的溶液做标准曲线，具体操作如下:按照 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 含量稀释 BSA 蛋白标准品，每个浓度（0、4 μL、8 μL、12 μL、16 μL、20 μLBSA，其余用 PBS 补齐至 20 μL）梯度做一个复孔。 2) 样品稀释测蛋白浓度：10 倍稀释法：取 18 μLPBS+2 μL 样品上清（经上步处理的样品 12000 r/min 离心 5 min

【求助】western

llh刘丽华 各位好：我做了1个多月western blot了，内参跑得还可以，但是目的蛋白总是跑不好，今天跑出来非特异性条带很清楚，而目的条带却很淡，不知是什么原因！前一次也是这种情况，我就延长封闭时间至2h，一抗1:700，二抗1:5000，请各位高手帮忙分析一下吧！下面是我的图片，最下面，模糊的一条（靠图片中间的一条）是我的目的条带！ coffeeshine 如果非特异带很清楚，延长封闭时间没作用

【原创】暗室实验（化学发光底物检测方法）及Western Blot实验优化方法

检测；再次检测结果仍为阴性，证明底物丧失活性。 暗室实验结果阳性： 认为二抗及底物活性良好； Western Blot 系统需要进一步优化 优化抗原和抗体浓度的斑点杂交方法：斑 点 杂 交 方 法——优 化 抗 原 和 抗 体 浓 度 对于一个给定的抗原，最佳的抗体浓度依赖的抗原和抗体本身。抗原和抗体的亲和力，以及一抗与二抗的特异反应都是不同的。最优抗原和抗体浓度可通过免疫印迹实验中使用不同浓度的抗原和抗体作用确定。另外，更快和更简单的方法是进行斑点印迹实验。以下是使用超敏感信号底物进行