9003S, SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads)

9003S, SimpleChIP® Enzymatic C

hromatin IP Kit (Magnetic Beads)
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  • #9003S
  • 2025年07月15日
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    • 供应商

      Cell Signaling Technology

    • 库存

      大量

    • 是否单克隆

      单克隆

    • 保存条件

      4℃ and -20℃

    • 规格

      1 Kit

    ChIP全线试剂&表观7大门类大促(20190715-0926),下拉至页底了解详情。


    9003S,点击跳转到CST中国官网了解详情

    9003S, SimpleChIP® Enzymatic C


    试剂盒特点:

    ①采用微球菌核酸酶温和地消化染色质,显著优于超声法,可保证染色质-DNA完整性;
    ②包含阳性对照组蛋白H3抗体,能明显富集所检测的所有位点;
    ③包含阴性对照Normal Rabbit IgG;
    ④包含人和鼠RPL30阳性引物;
    ⑤包含ChIP级蛋白G磁珠;
    ⑥适于PCR,qPCR,ChIP on chip,克隆和ChIP-sequencing等下游实验。

    试剂盒组分:

    Kit Includes Quantity
    DNA Binding Buffer 30 ml
    DNA Wash Buffer (add 4x volume ethanol before use) 6 ml
    DNA Elution Buffer 1 ml
    DNA Purification Columns 36 Pack
    Micrococcal Nuclease #10011 60 µl
    Proteinase K 100 µl
    Normal Rabbit IgG #2729 50 µl
    Histone H3 (D2B12) XP®Rabbit mAb (ChIP Formulated) #4620 100 µl
    Glycine Solution (10X) 100 ml
    Buffer A (4X) 25 ml
    Buffer B (4X) 25 ml
    ChIP Buffer (10X) 20 ml
    ChIP Elution Buffer (2X) 7 ml
    5 M NaCl 3 ml
    0.5 M , pH 8.0 #7011 1 ml
    Protease Inhibitor Cocktail (200X) 750 µl
    RNAse A (10 mg/ml) 50 µl
    SimpleChIP®Human RPL30 Exon 3 Primers #7014 150 µl
    SimpleChIP®Mouse RPL30 Intron 2 Primers #7015 150 µl
    DTT (Dithiothreitol) #7016 192.8 mg
    ChIP-Grade Protein G Magnetic Beads #9006 1 ml


    Specificity / Sensitivity

    SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit与ChIP-validated antibody一起可以去检测内源性的蛋白质-DNA相互作用和哺乳动物细胞中组蛋白修饰(见图2和3)。阳性对照Histone H3 Antibody可检测高度保守的Histone H3蛋白的许多不同物种,包括人、小鼠、大鼠和猴。引物包含人源和小鼠阳性对照RPL30基因位点;但是,该试剂盒中其它物种的使用需要额外设计对照引物。

    Description

    SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads)包含缓冲液和试剂,足够进行6次染色质准备和30次染色质免疫沉淀,并且每次实验最佳的细胞数为4 X 107 。一个完整的实验需要至少两天的时间,并且使用过多或过少的细胞数都会造成些不好的影响。细胞使用甲醛固定,通过微球菌核酸酶可以在一定程度上酶切染色质成片段,从而获得1-5个核小体的染色质片段。染色质的酶切片段是比超声更加温和以及消除了由超声功率的可比性以及在超声讲解中染色质的乳化作用带来的问题,这能够导致染色质的不完全片段化或由于蛋白质变性和降解造成的抗体表位的损失。使用ChIP-validated antibodies和ChIP-Grade Protein G Agarose Beads进行染色质免疫沉淀。在蛋白质-DNA交联的逆转之后,使用DNA纯化旋转柱被纯化,这允许DNA更容易和高效的恢复,并且蛋白质的移除不需要苯酚/的提取和乙醇的沉淀。在免疫沉淀中特定的DNA序列的浓缩能够通过standard PCR、quantitative real-time PCR或 ChIP on chip、sequencing 和cloning techniques的扩增被分析。SimpleChIP® Kit也提供重要的对照去保证一个成功的ChIP实验。该试剂盒包含一个阳性对照Histone H3 Antibody、一个阴性对照Normal Rabbit IgG Antibody和用于PCR的人源和小鼠ribosomal protein L30 (RPL30)基因引物对。Histone H3是一个染色质中心部分,并且穿过基因组结合到许多DNA序列上,包括RPL30位点。因此,Histone H3 Antibody 提供一个普遍的阳性对照,对于任何位点检测都应该比较丰富。

    Background

    chromatin immunoprecipitation (ChIP)实验室一个强大的和通用的技术,它用于检测在细胞的天然染色质中蛋白质-DNA的相互作用(1,2)。该分析通常被用于鉴定与一个基因组的特异区域或对立面有关的多种蛋白质,或者去鉴定基因组的许多一个特定蛋白结合区域(3-6)。它可以用来确定不同蛋白质的特异性招募到一个基因的启动子或去测量在整个基因上一个特定组蛋白修饰的相对数量(3,4)。除了组蛋白之外,ChIP实验通常用来分析转录因子的结合和辅助因子、DNA复制因子和DNA修复蛋白。当进行ChIP实验时,细胞或组织首先用甲醛固定,甲醛是一个可逆的蛋白质-DNA交联试剂,它可保留细胞中蛋白质-DNA相互作用事件(1,2)。细胞被裂解以及染色质被收获,并且使用声波降解法或酶促消化去分裂染色质。然后,使用特异性的特定蛋白质或组蛋白修饰的抗体进行免疫沉淀染色质。任何DNA序列都与蛋白质相关或者感兴趣的组蛋白修饰将与交联染色质的部分共沉淀,以及通过免疫选择过程DNA序列的相对数量可以被丰富。在免疫沉淀之后,蛋白质-DNA交联是可逆的,以及DNA被纯化。Standard PCR或Quantitative Real-Time PCR通常用于检测通过一个蛋白质特异的免疫沉淀的DNA序列相对数量(1,2)。二者择一地,ChIP分析能够结合 genomic tiling micro-array (ChIP on chip)技术、高通量测序或克隆,所有这些都能进行蛋白质-DNA相互作用的全基因组分析和组蛋白修饰(5-8)。


    Application References

    1. Onishi, Y. (2010) Biosci Rep , .Applications:Chromatin IP

    产品链接:http://www.cst-c.com.cn/products/9003.html
    产品说明书:http://media.cellsignal.com/pdf/9003.pdf;
    实验步骤: http://www.cellsignal.com/product/protocol.jsp?id=500908031



    验证数据详情见官网: www.cst-c.com.cn

    促销活动详情:

    促销时间
    2019年7月15日—2019年9月26日


    优惠一

    购买任一ChIP试剂盒(见下表1),将特别赠送经ChIP或ChIP-seq验证的小包装抗体一支(见下表2)或精美礼品一份(见优惠二)。

    促销试剂盒列表1
    货号 产品名称 应用
    56383S SimpleChIP® Plus Sonication Chromatin IP Kit(超声法,磁珠) ChIP ChIP-seq
    9005S SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads)(酶解法,磁珠) ChIP ChIP-seq
    9004S SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Agarose Beads)(酶解法,琼脂糖微珠) ChIP
    9003S SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads)(酶解法,磁珠) ChIP ChIP-seq
    9002S SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Agarose Beads)(酶解法,琼脂糖微珠) ChIP
    56795S SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina®(DNA 文库构建) ChIP-seq

    赠送抗体列表2
    9003S, SimpleChIP® Enzymatic C


    优惠二

    一次性购买促销抗体(优惠一中6个ChIP试剂盒除外)目录价格达7000元,即可获赠精美礼品一份。
    9003S, SimpleChIP® Enzymatic C

    查询参加促销的具体产品,点击此处或微信公众号「CST博士互助平台」后台回复促销,了解促销详情。

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