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Colilert( 科立得) 24 小时即可定性/ 定量检测总大肠菌群(Coliform) 和大肠埃希氏菌(E.Coli)
爱德士的 科立得® 试剂在全球广泛的被使用在检测水中总大肠菌群、大肠埃希氏菌以及耐热大肠菌群（粪大肠菌群）。在美国, 90 ％以上的实验室使用 科立得® 的专利[固定底物技术酶底物法] (Defined Substrate Technology, DST®) 。在美国、加拿大与日本的饮用水市场 科立得® 的使用率事实上大于其它所有检验方法的总和。。
科立得™ 获得美国环保署的认可，并列为《水与废水检验标准测试方法》。在中国，科立得™是唯一商品化的固定底物技术酶底物法而列入中国 国家标准《生活饮用水标准检验方法》（GB/T5750.12-2006）。
如何使用科立得®
定性测试（P/A ）
第一步
在100ml水样中加入科立得®试剂，混匀，36℃±1培养24h。
第二步 判读结果
无色=阴性
黄色=总大肠菌群阳性
黄色＋荧光=大肠埃希氏菌阳性
注：耐热大肠菌群（粪大肠菌群）需44.5℃培养24h后，观察黄色为阳性
定量检测
第一步
在100ml水样中加入科立得®试剂，混匀
第二步
倒入Quanti-Tray™（51孔）或者 Quanti-Tray™/2000 （97孔）定量盘中
第三步
用程控定量封口机对定量盘进行封装，36℃±1℃培养24小时
第四步
Quanti-Tray™ 51 孔定量盘结果判读
无色=阴性
黄色格子=总大肠菌群
黄色＋荧光格子=大肠埃希氏菌
对照MPN表计算结果
注：耐热大肠菌群（粪大肠菌群）需44.5℃培养24h后，观察黄色格子，为阳性结果，对照MPN表
Quanti-Tray™/2000 97孔定量盘结果判读
无色=阴性
黄色格子=总大肠菌群
黄色＋荧光格子=大肠埃希氏菌
对照MPN表计算结果
注：耐热大肠菌群（粪大肠菌群）需44.5℃培养24h后，观察黄色格子，对照MPN表
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科立得(Colilert)® 优点
准确/可信
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精确检出100ml水样中单个的活性总大肠菌群和大肠埃希氏菌，以及粪大肠菌群，假阴性率低.
每个单位试剂可抑制200万个异养细菌，假阳性率低.
消除传统方法中的主观判断影响，准确性高于滤膜法及多管发酵法.
2006年被列入到《生活饮用水标准检验方法》（GB/T5750.12-2006）， 是唯一认可的 MMO-MUG 培养基； 经美国环保署的认可作为24 小时检验出厂水与源水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌或耐热大肠菌群（粪大肠菌群）的方法；通过水与废水检验的标准方法 分析化学工作者协会 (AOAC) 、国际瓶装水协会 (IBWA) 及欧洲瓶装水协会 (EBWA)认证；美国、加拿大、英国、德国、法国、日本、韩国、阿根廷、巴西、澳大利亚、新西兰、南非等50多国家及地区的饮用水，地表水，污水等检验标准.
年全球使用量超过数千万次，美国90%以上的实验室使用科立得®。
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简单/快捷
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检测总大肠菌群和大肠埃希氏菌时间不超过24小时，2个指标一次完成，无需确认试验
简单培训就能轻松使用，手工操作少于一分钟.
不会因为过滤阻塞（滤膜法）或异样细胞的干扰（多管法）而进行重复测试.
科立得®和51或97孔定量盘联合使用，不用稀释可以定量检测100ml水中1~200个或1~2419个目标细菌.
无需玻璃器皿清洗及菌落计数.
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科学性：科立得(Colilert)® 的工作原理
科立得®的成分是受专利保护的MMO-MUG选择性培养基（Minimal Media ONPG-MUG）。
当科立得®加入含有总大肠菌群细菌组的水样，目标细菌在MMO-MUG培养基中繁殖，大肠菌群细菌组产生的特异性生物酶β－半乳糖苷酶能分解MMO-MUG培养基中的色原底物ONPG，使培养基呈现黄色反应；同时水样中大肠埃希氏菌产生特异性的β－葡萄糖醛酸酶分解MMO-MUG培养基中的荧光底物MUG，产生特征性荧光。同样原理，耐热大肠菌群（粪大肠菌群）在培养44.5℃时会分解MMO-MUG培养基中的色原底物ONPG，使培养基呈现黄色反应。
大肠杆菌以β-葡糖醛糖苷酶代谢甲基香豆基葡糖醛酸苷（MUG）产生萤光。因为大多数非─大肠杆菌属菌类没有这些酶，所以无法在 科立得® 里生长及干涉这些物质。
有这些酶的少数非─大肠杆菌属菌类会受到 科立得® 特殊配方的基质选择性的抑制作用。
科立得®可以定性检测水中大肠菌群和大肠埃希氏菌以及粪大肠菌群。当水样中少数非目标细菌的生物酶试图和ONPG或MUG反应，干扰检测结果时， MMO-MUG培养基中特殊配方的基质会抑制其反应进程，控制假阳性的产生；同时，这些特殊配方基质可以有效促进目标细菌的生物酶和底物反应， 所以假阴性发生率比传统方法更低。 这就是采用固定底物技术（DST）的酶底物法，及其专利的MMO-MUG培养基。如果联合Quanti-Tray™（51孔定量盘）或者Quanti-Tray™2000（97孔定量盘）使用， 可以定量检测100ml水中1~200个或1~2419个目标细菌，而不要稀释，这就是固定底物技术（DST）酶底物法的多孔定量盘法。
普通的酶底物法采用ONPG-MUG培养基，而非MMO-MUG培养基，不能有效降低假阳性和假阴性的产生，也并非《生活饮用水标准检验方法》（GB/T5750.12-2006）的国标检测方法。
所有的爱德士「指定受检物检验技术」（DST®）试剂都可用于定性测试（P/A）检验容器、 Quanti-Tray™ 定量盘或 Quanti-Tray™ 定量盘/2000 检验盘里。
科立得(Colilert)® 问答集
科立得®的贮存条件是什么？
2-30°C避光储存。
2-30°C避光储存。
科立得® 阳性比色盘是什么？
科立得® 阳性比色盘是一种液体的比色剂。目的在于协助区别结果是否显阳性。
科立得® 阳性比色盘是一种液体的比色剂。目的在于协助区别结果是否显阳性。
科立得® 阳性比色盘如何使用？
在24-28小时期间，使用比色盘对照每个反应的样品。当检测结果颜色变化或者荧光显色不明显时，将比色盘与检测结果比较，任何与比色盘颜色相同或更强的黄色及萤光都考虑为阳性结果。
在24-28小时期间，使用比色盘对照每个反应的样品。当检测结果颜色变化或者荧光显色不明显时，将比色盘与检测结果比较，任何与比色盘颜色相同或更强的黄色及萤光都考虑为阳性结果。
科立得® 试剂应该是什么颜色？
科立得® 试剂应该是干燥，流动性的，白色或略带灰 (或黄) 色的白色。如遇到任何有关试剂颜色或有效性的问题请您与爱德士技术服务部门联络。
科立得® 试剂应该是干燥，流动性的，白色或略带灰 (或黄) 色的白色。如遇到任何有关试剂颜色或有效性的问题请您与爱德士技术服务部门联络。
科立得® 检测结果在28 小时后判读准确吗？
定性试验时，如果是阴性结果就有效。 做定量检测时，如果科立得® 超过培养时间，没有任何颜色变化是有效的阴性检验结果；超过 28 小时出现黄色是无效的结果，应重新检验。
定性试验时，如果是阴性结果就有效。 做定量检测时，如果科立得® 超过培养时间，没有任何颜色变化是有效的阴性检验结果；超过 28 小时出现黄色是无效的结果，应重新检验。
科立得®检测结果在24 小时内判读准确吗？
定性试验，如果培养未满24小时，而样品中总大肠菌群以及大肠埃希氏菌都显阳性，则此结果有效；如果只是大肠菌群呈阳性（黄色），则可证明总大肠菌群结果有效，还需要等到24小时后判断是否含有大肠埃希氏菌。
定性试验，如果培养未满24小时，而样品中总大肠菌群以及大肠埃希氏菌都显阳性，则此结果有效；如果只是大肠菌群呈阳性（黄色），则可证明总大肠菌群结果有效，还需要等到24小时后判断是否含有大肠埃希氏菌。
为何水样要培养 24-28 小时？
科立得®试剂中添加的抑制与ONPG和MUG反应的非大肠菌群属的抑制剂最多可以作用到28小时，如果超过了28小时，一些干扰细菌就会克服科立得®的抑制系统而与 ONPG 或 MUG 起反应。超过28小时的阴性结果有效，但是阳性结果需要进行确认试验。
科立得®试剂中添加的抑制与ONPG和MUG反应的非大肠菌群属的抑制剂最多可以作用到28小时，如果超过了28小时，一些干扰细菌就会克服科立得®的抑制系统而与 ONPG 或 MUG 起反应。超过28小时的阴性结果有效，但是阳性结果需要进行确认试验。
可以使用科立得®进行定量检测吗？
可以， 科立得®可用 Quanti-Tray™（51孔）定量盘 ,Quanti-Tray™ 2000（97孔）定量盘进行定量检测。
可以， 科立得®可用 Quanti-Tray™（51孔）定量盘 ,Quanti-Tray™ 2000（97孔）定量盘进行定量检测。
科立得®是否是中国国家标准方法？
是，科立得®已经列入中国《生活饮用水标准检测方法》GB/T5750.12-2006，是唯一商品化的固定底物技术酶底物法，其成分是MMO-MUG培养基，并受专利保护。
是，科立得®已经列入中国《生活饮用水标准检测方法》GB/T5750.12-2006，是唯一商品化的固定底物技术酶底物法，其成分是MMO-MUG培养基，并受专利保护。
科立得®的最低检出线是多少？
科立得®能检测出100ml水样中的1个总大肠菌群与大肠埃希氏菌以及粪大肠菌群菌体。
科立得®能检测出100ml水样中的1个总大肠菌群与大肠埃希氏菌以及粪大肠菌群菌体。
科立得®的贮存期有多久？
科立得®的贮存期从制造日期算起， 科立得®可贮存18个月。
科立得®的贮存期从制造日期算起， 科立得®可贮存18个月。
部分附件
Quanti-Tray定量程控封口机
Quanti-Tray 51孔定量盘橡胶衬垫 或 Quanti-Tray 97孔定量盘橡胶衬垫
Quanti-Tray 51孔定量盘 或 Quanti-Tray 2000 97孔定量盘®
Colilert 51孔阳性比色盘 或 Colilert 97孔阳性比色盘
Colilert定性阳性比色瓶
取样瓶
紫外灯
培养箱
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文献和实验相关实验
环化以及缩短或删除环区等步骤来提高。决定蛋白质高热稳定性的两个主要因素被认为是氢键增加和离子键网络的形成 [ 8~10] 。 然而，由于分子水平上对蛋白质热稳定性仍未有完整的认识，把蛋白质改造成热稳定性高的蛋白质仍然是个难题[ (11 ] 。计算和比较研究法用于识别其稳定作用并已经成功地加以应用 [ 12~14 ] 。然而它们必须依赖于有良好分辨率的晶体或核磁共振结构。结构中能清楚地看到 Cα 的轮廓，并且能获得许多同源序列，最好是嗜热来源的。此外，模拟达尔文优化循环“突变、重组和选择”的进化方法
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