一次性膜片摇瓶(TF-500) 微生物/动物细胞悬浮培养

支原体污染的特点及检验（1）

体为散在于细胞同围或附于细胞膜表面的亮绿色小点。 ③电镜检查；用扫描电镜方法简便快速。也可以利用透射电镜。 ④DNA分子条文检查或支原体培养等方法：检出率高。但方法较为复杂 支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，大小一般在0.3-0.5um之间，呈高度多形性，有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞，也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色，用姬姆萨染色很浅，革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长，营养要求比细菌高。 细胞培养（特别是传代细胞）被支原

人 iPS 细胞体外分化为气道上皮肺类器官用于呼吸系统疾病研究应用以及iPSC操作指南

。 5. 每孔加入2ml 1X PBS (BSS-1006-B)稀释AccuMax™溶液(A7089)。将细胞悬浮液置于50ml锥形管中。用1ml 1X PBS冲洗每孔，收集任何剩余的细胞，并加入到50ml锥形管中。移液器上下吹打几次以实现单细胞悬浮状态。 6. 室温下，细胞悬液130 x g离心5分钟。 7. 吸出上清液。 在 2 mL 的 AFE 诱导培养基 I (SCM305) 中重新悬浮细胞沉淀。 使用自动细胞计数器或血细胞计数器对细胞进行计数。 在 PBS 中配制4μg/mL的纤连蛋白 (F

流式细胞仪检测线粒体膜电位

。用PBS洗涤细胞一次，离心后弃上清。 5．细胞悬液中加入500 μL JC-1染色工作液重悬细胞。37°C，5%CO2培养箱中孵育15-20 min。 注：培养温度与细胞类型有关，一般哺乳动物细胞建议37°C，其他种属根据细胞培养条件选择合适的温度。 6．300 g离心5 min，弃上清，加入500 μL预冷的1x JC-1 Assay Buffer洗涤2次。 7．加入500 μL预冷的1x JC-1 Assay Buffer重悬细胞。 8．样本置于冰上保存，30 min内用流式细胞仪检测。 三