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1g/20ml
潮霉素B是aminoglycosidic的的抗生素,抑制原核生物和真核生物蛋白质合成。它是用来选择和保持稳定转染真核细胞E. 大肠杆菌潮霉素抗性基因(HYG或HPH)。
仅用于生命科学研究。
作用机理:
潮霉素B是由吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)产生的一种氨基糖苷类抗生素,通过抑制蛋白质合成能杀死细菌、真菌和高等真核细胞,用于筛选和保持转化(转染)有潮霉素抗性基因的原核和真核细胞。
潮霉素B与大多数氨基糖苷类抗生素一样,通过中断易位并增加 80S 核糖体上的错误翻译抑制蛋白质的合成。可以稳定核糖体大亚基上的tRNA结合位点,导致空载tRNA不能脱离核糖体,抑制了翻译的继续进行,潮霉素的抑制作用对于原核细胞与真核细胞的核糖体都是有效的。
由于它所采用的作用模式与 Geneticin®、Blasticidin S 和 Zeocin™ 不同,因而十分适合与其它选择试剂配合用于双选择实验。
抗性基因:
潮霉素B磷酸转移酶(Hph)提供对潮霉素的抗性。Hph催化环醇的4—OH基团,产生在体内体外都失去活性的7"-O型磷酸化潮霉素B。
已经有两种编码Hph的基因。第一种基因是从产生潮霉素B的Streptomyces hygroscopicus中分离出来。第二种基因是Escherichia coli 和Klebsiella pneumoniae中分离出来的一种质粒传染抗性基因。在基因转染实验中使用的大部分潮霉素B载体利用的是E. coli的hph基因。
理化性质:
溶解性:水溶性
样品状态:溶液,50 mg/ml,缓冲液为PBS(phosphate-buffered saline),经过0.2 µm孔径滤膜过滤。
纯度:>98% (HPLC)
LD50:小鼠(i.v.)6 mg/kg;天竺鼠(i.p.) 13 mg/kg; 大鼠 (i.p.) 63 mg/kg
工作浓度:细胞培养中为50 - 1,000 µg/ml。哺乳动物细胞培养通常使用的浓度为200 µg/ml。但是,最适浓度必须通过实验确定,这需要根据细胞类型不同而改变。
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