ELISA检测人伤寒抗原(St-Ag)试剂盒

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ELISA检测人伤寒抗原(St-Ag)试剂盒
英文名：Human salmonella typhi antigen,st-ag ELISA KIT
品牌：百奥莱博
产地：国产(默认)|进口(需核实有无)
种属：人
编号：ARB10585
保存温度：2～8℃
有效期：180天
规格：96T/盒


定量分析实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中伤寒抗原(St-Ag)水平。用纯化的伤寒抗原(St-Ag)抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加入伤寒抗原(St-Ag)，再与HRP标记的伤寒抗原(St-Ag)抗原结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的伤寒抗原(St-Ag)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中伤寒抗原(St-Ag)浓度。


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ELISA检测人伤寒抗原(St-Ag)试剂盒关键词：伤寒抗原,St-Ag,试剂盒
可用作ELISA测定伤寒抗原(St-Ag)的标本十分广泛，体液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液）、细胞培养上清、细胞、组织等均可作标本以测定其中某种成份。有些标本可直接进行测定，有些则需经预处理。
◆ 血清：
室温血液自然凝固 10-20 分钟后，离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 / 分）。收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。
◆ 血浆：
应根据试剂盒的要求选择 EDTA 、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，加入 10 ％（ v/v ）抗凝剂 ( 0.1M 柠檬酸钠或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合 10-20 分钟后，离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 / 分）。仔细收集上清。如有沉淀形 成，应再次离心。
◆ 尿液、胸腹水、脑脊液：
用无菌管收集。离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 / 分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。
◆ 细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的 成份时，用 PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到 100 万 /ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
◆ 细胞：
检测细胞的成份时，对于贴壁细胞，去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。加入适量裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞10 秒后，细胞就会被裂解。对于悬浮细胞，离心收集细胞，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍.加入适量裂解液, 用枪吹打把细胞吹散。用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装然后再裂解。充分裂解后，10000-14000g离心3-5 分钟，取上清，即可进行后续操作。
◆ 组织标本：
切割标本后，称取重量。加入一定量的 PBS或组织蛋白萃取试剂，缓冲液中可加入蛋白酶抑制剂。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 / 分）。仔细收集上清置于 -20 度或 - 70 度保存，如有必要，可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测，其余冷冻备用。


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ELISA检测人伤寒抗原(St-Ag)试剂盒关键词：伤寒抗原,St-Ag,试剂盒
人伤寒抗原(St-Ag)ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法：
1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。



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采用Elisa方法检测伤寒抗原(St-Ag)，加样时应注意：加样不可太快，要避免加在孔壁上部，不可溅出和产生气泡。加样太快，无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区，易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。所以，有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性，下次测定为阴性，往往就是上述加样及试剂的错误所致。



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