大鼠ET-1elisa测定使用说明书使用说明书

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英文名：Rat endothelin 1,et-1 ELISA KIT
品牌：百奥莱博
保存温度：2～8℃
有效期：180天
种属：大鼠
产地：国产(默认)|进口(需核实有无)
规格：96T/盒
编号：ARB12078


定量分析实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中内皮素1(ET-1)水平。用纯化的内皮素1(ET-1)抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加入内皮素1(ET-1)，再与HRP标记的内皮素1(ET-1)抗原结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的内皮素1(ET-1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中内皮素1(ET-1)浓度。


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大鼠内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒订货说明：
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大鼠内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒试剂盒说明：96T的ELISA试剂盒最多可检测90个样本(不做复孔的情况下)，其中拟合标准曲线6个酶标空(5个标准空，一个空白对照)。
适用种属：人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。


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可用作ELISA测定内皮素1(ET-1)的标本十分广泛，体液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液）、细胞培养上清、细胞、组织等均可作标本以测定其中某种成份。有些标本可直接进行测定，有些则需经预处理。
◆ 血清：
室温血液自然凝固 10-20 分钟后，离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 / 分）。收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。
◆ 血浆：
应根据试剂盒的要求选择 EDTA 、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，加入 10 ％（ v/v ）抗凝剂 ( 0.1M 柠檬酸钠或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合 10-20 分钟后，离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 / 分）。仔细收集上清。如有沉淀形 成，应再次离心。
◆ 尿液、胸腹水、脑脊液：
用无菌管收集。离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 / 分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。
◆ 细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的 成份时，用 PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到 100 万 /ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
◆ 细胞：
检测细胞的成份时，对于贴壁细胞，去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。加入适量裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞10 秒后，细胞就会被裂解。对于悬浮细胞，离心收集细胞，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍.加入适量裂解液, 用枪吹打把细胞吹散。用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装然后再裂解。充分裂解后，10000-14000g离心3-5 分钟，取上清，即可进行后续操作。
◆ 组织标本：
切割标本后，称取重量。加入一定量的 PBS或组织蛋白萃取试剂，缓冲液中可加入蛋白酶抑制剂。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 / 分）。仔细收集上清置于 -20 度或 - 70 度保存，如有必要，可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

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