小鼠脏器组织单核细胞分离液库存

脐带血单个核细胞分离方法和注意事项

脐带血是指胎儿出生时脐带内及胎盘近胎儿一侧血管内的血液。脐带血单个核细胞（Cord Blood Mononuclear Cell，CBMC) 分离自正常人胎盘脐带组织，是脐带血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞和单核细胞等，是机体防御系统的一个重要组成部分。 1    原理 单个核细胞的体积、形态和比重与其它细胞不同，在沉降过程中不同比重的细胞会处于不同的分布位置。因此，可利用各种血细胞和单个核细胞比重之间的差异将各种血细胞与单个核细胞分离开来。 2    方法 1）  取新鲜抗凝脐带

Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞

0.001 的 聚 蔗糖(Ficoll)-泛影葡胺(Urografin)(F／H)分层液。Ficoll是蔗糖的多聚体，呈中性，犌W水性高，平均分子 量为400,000，当密度为1.2g／ml仍未超出正常生理性渗透压,也不穿过生物膜。红细胞、粒细胞比重大，离心后沉于管底；淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分层液比重，离心后漂浮于分层液的液面上，也可有少部分细胞悬浮在分层液中。吸取分层液液面的细胞，就可从外周血中分离到单个核细胞。 　　(二)　方法: 　　1.　在短中管中加入适量淋巴细胞分离液

哮喘动物模型制作的个人经验

肺泡灌洗 BAL 及 BALF 中嗜酸性粒细胞 EOS 百分比记数大鼠心脏采血致死后 立即充分暴露颈部区域 蚊式钳分离气管 插入 22G留置针 缝线固定 用冷生理盐水 NS 灌洗 反复灌洗 8 次 每次 1ml 回吸率平均在 80% 离心 弃上清 吸取细胞沉渣 50ìl涂片 干燥固定 Diff Quik染色 显微镜下分类记数 2×200 个细胞 依据形态学特点将细胞分为中性粒细胞Neu嗜酸性粒细胞Eos淋巴细胞 Lym 和单核细胞 Mon3 .3 组织标本留取及组织形态学分析打开未经支气管肺泡灌洗的大鼠胸腔