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EMSA突变探针-STAT5(
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北京百奥莱博科技有限公司
60μl
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售EMSA突变探针-STAT5(1.75μM),我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
品牌:百奥莱博规格:60μl编号:YT261产地:国产|进口EMSA突变探针-STAT5是用于EMSA(也称gel shift)研究的STAT5 consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针-STAT5的阴性对照,用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。EMSA突变探针-STAT5的序列如下:5"-AGA TTT AGT TTA ATT CAA TCC-3"3"-TCT AAA TCA AAT TAA GTT AGG-5"EMSA突变探针-STAT5中STAT5的公认的结合位点发生了突变,从而使STAT5无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中,正常的标记探针和STAT5的结合的条带会被抑制;而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中,正常的标记探针和STAT5的结合的条带不会被抑制。1,阴性对照反应(标记探针);2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针);3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记探针);4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针);5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异抗体)。一个包装的突变探针,如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应,可以进行30-60个突变探针的冷竞争反应。保存条件:-20℃保存,一年有效。注意事项:避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。我公司的EMSA突变探针-STAT5(1.75μM),性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销售下列产品:·化学发光法生物素标记核酸检测试剂盒编号:YT032英文名称:Chemiluminescent Biotin-labeled Nucleic Acid Detection Kit规格:1000cm2化学发光法生物素检测试剂盒是一种通过Streptavidin-HRP及后续的BeyoECL Star试剂来实现化学发光检测Biotin标记核酸的检测试剂盒。适用于Southern blot、Northern blot、ribonuclease protection assay (RPA)或EMSA等实验中,采用生物素标记的DNA或RNA探针时的检测。本试剂盒不适用于生物素标记蛋白的检测。本试剂盒同时还提供了封闭液、洗涤液等检测时所需的配套试剂。本试剂盒采用了高质量的Streptavidin-HRP Conjugate,HRP和Streptavidin共价交联的比例大于3,这样比采用Streptavidin和Biotin-HRP conjugate两种试剂进行检测要更方便,并且灵敏度更高。采用了非特异性结合比avidin更低的strepatavidin,使检测结果背景更低灵敏度更高。本试剂盒没有提供生物素探针标记相关的试剂,生物素标记的DNA探针或EMSA探针的制备可以相应地使用我公司生产的生物素3"末端DNA标记试剂盒(D3106)或EMSA探针生物素标记试剂盒(GS008)。本试剂盒可以用于检测至少10块10 x 10cm有生物素标记EMSA探针的膜,即共1000cm2。保存条件:D3308-3 Streptavidin-HRP Conjugate在-20℃保存,其余可4℃保存。如果长期不用,整个试剂盒可-20℃保存,-20℃可以保存更长时间。注意事项:需自备带正电荷尼龙膜,以及凝胶电泳时所需的相关试剂。带正电荷尼龙膜(FFN12/FFN16)可以向我公司订购。如果需要使用更多的封闭液或洗涤液,可另外单独订购D3308B封闭液或D3308W洗涤液(5X)。使用说明:1. 在使用Biotin标记探针的情况下,完成Southern、Northern杂交及后续洗涤后,或RPA的转膜和交联后,或EMSA的转膜和交联后,可以使用本试剂盒开始检测。下面的检测过程中溶液的用量是用于一片10x10cm膜的量。如果膜较大或较小,各溶液的用量可以按比例放大或缩小。2. 37-50℃水浴溶解封闭液和洗涤液。注意:封闭液和洗涤液必须完全溶解后方可使用,封闭液和洗涤液可以在室温至50℃之间使用,但必须确保这两种溶液中均无沉淀产生,在冬天需特别注意。3. 取一合适的容器加入15ml封闭液,再放入交联过的含有样品的尼龙膜。在侧摆摇床或水平摇床上缓慢摇动15分钟。4. 取7.5μl Streptavidin-HRP Conjugate加入到15ml封闭液中(1:2000稀释),混匀备用。5. 去除封闭液,加入上一步中配制的15ml含有Streptavidin-HRP Conjugate的封闭液。在侧摆摇床或水平摇床上缓慢摇动15分钟。6. 取25ml 洗涤液(5X),加入100ml重蒸水或MilliQ级纯水,混匀配制成125ml洗涤液。7. 将尼龙膜转移至另一装有15-20ml洗涤液的容器内,漂洗1分钟。8. 去除洗涤液,加入15-20ml洗涤液,在侧摆摇床或水平摇床缓慢上洗涤5分钟。9. 重复步骤8三次(共洗涤四次),每次洗涤时间均约为5分钟。10. 将尼龙膜转移至另一装有20-25ml检测平衡液的容器内,在侧摆摇床或水平摇床上缓慢摇动5分钟。11. 取5ml BeyoECL Star A液和5ml BeyoECL Star B液混匀,配制成BeyoECL Star 工作液。注意:BeyoECL Star工作液必须现配现用。说明:从本步骤起操作方法和注意事项同Western实验的荧光检测。12. 取出尼龙膜,用吸水纸吸去过多液体。立即将膜的样品面向上,放置到处于水平桌面上的洁净容器内或保鲜膜上。13. 在尼龙膜的表面小心加上步骤11配制好的共10ml BeyoECL Star工作液,使工作液完全覆盖尼龙膜。室温放置2-3分钟。14. 取出尼龙膜,用吸水纸吸去过多液体。将尼龙膜放在两片保鲜膜或其它适当的透光薄膜中间,并固定于压片暗盒(也称片夹)内。15. 用X光片压片1-5分钟。可以先压片1分钟,立即显影定影,然后根据结果再调整压片时间;也可以直接分别压片30秒、1、3、5分钟或更长时间,然后一起显影定影观察结果。EMSA突变探针-STAT5(1.75μM)关键词:EMSA突变探针-STAT5,YT261,1.75μM·免疫染色洗涤液编号:YT089英文名称:Immunol Staining Wash Buffer规格:250ml免疫染色洗涤液可以用于免疫染色时一抗或二抗孵育后的洗涤。适当的洗涤可以降低背景,增强信噪比。本免疫染色洗涤液中含有适量Triton X-100,可以通透细胞膜。经本免疫染色洗涤液处理的细胞样品可以检测细胞内的目的蛋白,包括细胞浆内和细胞核内的目的蛋白。照每组样品洗涤需要5-10毫升免疫染色洗涤液计算,一个包装的免疫染色洗涤液可以洗涤25-50次。保存条件:4℃保存,一年有效。注意事项:本免疫染色洗涤液经过滤除菌处理,使用过程中应尽量避免细菌污染。一旦启用后建议在2周内用完。使用说明:在一抗或二抗孵育结束后,加入少量免疫染色洗涤液,使之能盖住样品,在摇床上缓慢摇动洗涤5分钟后,吸尽洗涤液,再加入新的洗涤液洗涤。共洗涤3次,每次5分钟。然后进行后续的操作。如果摇动容易导致样品脱落,可以在不摇动的情况下浸泡洗涤。在浸泡洗涤的情况下,需适当延长洗涤时间至8-10分钟/次,增加洗涤次数至4-5次。如果按照上述洗涤条件免疫染色结果背景仍然较高,可以适当延长洗涤时间,并增加洗涤次数。通常,延长洗涤时间或增加洗涤次数不会对免疫染色结果产生负面影响。EMSA突变探针-STAT5(1.75μM)关键词:EMSA突变探针-STAT5,YT261,1.75μM·Bax抗体编号:YT150英文名称:Bax antibody规格:>20次本Bax抗体为进口分装,以人工合成的Bax氨基端(Amino-terminal)的一段多肽为抗原制备而成的抗Bax小鼠单克隆抗体。克隆号为6A7(Clone6A7),是应用最广的Bax抗体。抗体类型为Mouse IgG1。本Bax抗体可以检测内源性水平的Bax,未发现和其它Bcl-2家族蛋白有交叉反应。Bax是一种促凋亡蛋白,上调Bax蛋白水平可以促进细胞凋亡。在通过线粒体应激诱导的细胞凋亡中Bax起关键作用。Bax可以形成寡聚体,然后从细胞浆中转移到线粒体膜上;通过和线粒体膜上的一些pore proteins相互作用,增强线粒体的通透性(permeability);最后导致细胞色素c释放(cytochrome c release)、caspase-9激活以及后续的其它caspase激活和最终的细胞凋亡。Bax可以和Bcl-2形成多聚体,来调节线粒体膜的通透性,最终调节细胞的凋亡或存活。配套提供了Western一抗稀释液,可以用于Western检测时的一抗稀释。本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。保存条件:Bax抗体-20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。注意事项:对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
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