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北京百奥莱博专业生产销售5×TBE缓冲液 分子生物学试剂,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:5×TBE缓冲液 分子生物学试剂
编号:XH004
品牌:百奥莱博
规格:500ml
试剂组成:Tris碱,硼酸和0.5M EDTA
配方(1L):54g Tris
27.5g 硼酸
20ml 0.5M EDTA(pH8.0)
此产品经滤纸过滤。
使用时,如果用于琼脂糖电泳,可以稀释10倍,配成0.5×使用。如果用于PAGE,配胶时加入量为1/5(配10ml胶加入2ml),电泳依旧可以使用0.5×的。此产品也可以配成10×,但配好后不太稳定,溶液产生沉淀。
注:
1 此溶液可用双蒸水稀释。
2 此溶液非无菌。
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·抗原修复液(EDTA型)(50X)
编号:XH084
规格:100ml/500ml
产品简介:
EDTA抗原修复液(EDTA Antigen Retrieval Solution)是一种常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),从而遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。
本抗原修复液采用了广泛使用的EDTA,可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。储存条件:2~8℃,有效期一年。
使用说明:
使用前请用双蒸水将原液(50X)稀释50倍成(1X),1X抗原修复液为工作液
1. 对于石蜡切片:
a. 脱蜡:切片在二甲苯中脱蜡5分钟,再换用新鲜的二甲苯脱蜡,共用二甲苯脱蜡3次。无水乙醇5分钟,两次。90%乙醇5分钟,两次,70%乙醇5分钟,一次。蒸馏水5分钟,两次。
b.抗原修复:将切片浸泡在抗原修复液(1X)中,95-100℃加热约15分钟(加热时间可以控制在10-20分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1X)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2次,每次3-5分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
2. 对于冰冻切片:
用免疫染色洗涤液洗涤切片5分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1X)中,95-100℃加热约15分钟(加热时间可以控制在10-20分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1X)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2次,每次3-5分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
3. 对于其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。
5×TBE缓冲液 分子生物学试剂关键词:XH004,5×TBE缓冲液,百奥莱博
·SABC(兔IgG)-POD免疫组化试剂盒
编号:XH110
规格:100T
试剂盒组成:
1, 封闭液(5%BSA):10ml。
2, 3% H2O2:10ml。
3, Bio-羊抗兔IgG:浓缩液100ul。
4, SABC-POD:浓缩液100ul。
5, 稀释液:30ml。
6, 显色液(1ml+1ml):20×DAB显色液A,20×DAB显色液B。
试剂盒保存:如果一段时间不使用,请将所有试剂存放于-20℃,如经常使用,可将封闭液,封闭液和20×DAB显色液B存放于2-8℃以方便使用
试剂盒简介:
本试剂盒适合于一抗为兔IgG的免疫组化实验. DAB显色。
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex。SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。
自备试剂:
1.粘片剂多聚赖氨酸
2. 0.01 M PBS(pH7.2-7.4)
3. 0.01M柠檬酸钠缓冲液
4、苏木素
实验步骤: 微量试剂请离心后使用
以石蜡切片为例
1. 切片常规脱蜡至水(三次二甲苯,三次乙醇)。
2. 3%H2O2室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
3.可选步聚:a、热修复抗原,将切片浸入0.01M 柠檬酸钠缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾后断电,间隔5-10分钟后,反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.4)洗涤1-2次。b、酶消化,滴加消化液,37℃10分钟, PBS(pH7.2-7.6)洗涤2-3次。c、跳过此步,直接进入下一步。
4. 滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 不洗。
5.用稀释液将一抗(如兔抗IL-10)按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗,37 ℃ 1小时左右或20℃时2小时左右。也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间。)
6.根据使用量,用稀释液将Bio-羊抗兔IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul Bio-羊抗兔IgG浓缩液,混匀即成工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加Bio-羊抗兔IgG工作液,20-37℃ 30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。
7.根据使用量,用稀释液将SABC-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-POD浓缩液,混匀即成SABC-POD工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-POD工作液,20-37℃,30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗5分钟×4次。
8.DAB显色:根据用量,用PBS(pH7.2-7.4)配制,按1mlPBS加入50ul 20×DAB显色液A,加入50ul 20×DAB显色液B 。混匀后加至切片。室温显色, 镜下控制反应时间,一般在5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
9.苏木素轻度复染。脱水,透明,封片。显微镜观察。
对于细胞片,常规固定后,PBS漂洗两次,再用0.5%Txiton X-100室温20分钟,PBS漂洗两次,3%H2O2处理15分钟;PBS漂洗两次,下接上面第4步。
对于冰冻切片,固定后,可用PBS漂洗两次,再接上面第二步。
注意事项:如果染色背景过高,在SABC反应之后,DAB显色之前,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后DAB显色。
因为免疫组化指标众多,标本不一,此步骤仅作参考。
5×TBE缓冲液 分子生物学试剂关键词:XH004,5×TBE缓冲液,百奥莱博
56-86-0 L-Glutamic acid L-谷氨酸
F030711 BIOTIN标记羊抗乙肝核心抗原抗体 Polyclonal Goat Anti-HBcAg*BIOTIN
HC0080 PCR管(平盖)
CV0201 pSURE -T Simple 载体连接试剂盒
ARB13733 兔胰淀素(AmylIn)含量测试 Rabbit amylin ELISA KIT
加拿大树胶 POPOP 8007-47-4
CYB163059 兔抗猴IgG-FITC
L-甘-缬二肽 CHAPSO 1963-21-9
ARB12691 大鼠凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)酶免分析 Rat coagulation factor ⅩⅢ,fⅩⅢ ELISA KIT
ARB12214 大鼠肉毒碱脂酰转移酶(CACT)酶联免疫定量检测 Rat carnitine-acylcarnitine translocase,cact ELISA KIT
ARB11927 大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)血清中含量检测 Rat 1,3-βd glucosidase,1,3-βd-glu ELISA KIT
BTN101122 尼龙膜 Nylon Membrane(Pharmacia)
PY02-259 布氏菌疫苗培养基 250克
ARB13526 兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)定量分析 Rabbit bcl-2 assaciated x protein,bax ELISA KIT
四丁基硫酸氢铵 DL-Serine methyl ester hydrochloride 32503-27-8
BL1060 乙酰胺琼脂
聚苯乙烯 Sodium 1-pentanesulfonate 9003-53-6
F030637 FITC标记山羊抗人IgG FC抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG FC*FITC
花宝1号 α-Amylase from Aspergillus oryzae
ARB10553 人孕酮受体(PGR)elisa测定使用说明书 Human progesterone receptor,pgr ELISA KIT
ARB12102 大鼠甘油三酯(TG)酶免分析 Rat triglyceride,tg ELISA KIT
C1801 巴比西鼠血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml
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