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- 详细信息
- 文献和实验
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- 保存条件:
冷藏
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长期
- 库存:
934
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
100ul/1ml
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售HRP-羊抗猪IgG优惠价,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
HRP-羊抗猪IgG优惠价
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:XH100
规格:100ul/1ml
辣根过氧化物酶(HRP)标记抗体,是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学的各个分支学科中的特异、敏感和安全的免疫化学制剂。我们生产的辣根过氧化物酶(HRP)标记羊抗猪IgG是将辣根过氧化物酶(HRP,来源于SIGMA),经过碘酸钠氧化而标记在抗体羊抗猪IgG(来源于我公司自己纯化的抗体)分子上,而制成HRP-羊抗猪IgG。
保存条件:-20℃冻存。浓度:抗体2mg/ml。HRP 1mg/ml
应用范围:HRP-羊抗猪IgG主要用于一抗来源于猪多抗(单抗也行)的后续实验。如免疫组化,Western blotting,ELISA等实验。
主要性能:
免疫组化:1:20~50,DAB显色
免疫印迹法:1:100~400,DAB显色,1:1000~5000,ECL发光显色
ELISA法:1:500~2000(最高可达一万),用TMB显色
关于HRP-羊抗猪IgG优惠价的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·植物线粒体DNA提取试剂盒
编号:XH002
规格:50T/100T
二,保存条件
本试剂盒整体保存于2-8℃一年,DNASE I -20℃保存。使用前,在DNase I中加入600ul(50T)或者1200ul(100T)的DNA酶反应液,分装后-20℃保存三个月,如果超过三个月,活性可能会降低,请自行订购DNASE I。线粒体裂解液使用前常温保存,如有沉淀可37℃水浴溶解,不影响使用。
三,说明
线粒体DNA提取的关键是尽可能的去掉核DNA。本试剂盒利用差速离心得到比较纯净的线粒体,再利用DNA酶消化和裂解缓冲系统等多步骤去掉核DNA,最后得到纯净的线粒体DNA。可用于PCR等对纯度要求较高的实验。
本试剂盒用于从植物叶片中分离出完整而纯化的线粒体。适合于田间采摘或者实验室培养的植物叶片中线粒体DNA的提取制备。
四,操作步骤
准备工作:在DNASE I中加入600ul(50T)或者1100ul(100T)的DNA酶反应液,适当分装后-20℃保存。线粒体裂解液保存于常温,如有沉淀37℃水浴溶解,离心机温度下降到4℃(2-8℃),如无低温离心机,也可以常温离心,并将离心时间为10min的改为5min,但最后所得DNA品质及产量可能会有一定影响。
1. 样本采集前处理:无论田间自然生长还是实验室组织培养,采摘前须避光生长24-48小时,以减少叶片组织中糖类及叶绿体含量。取适量植物细胞裂解液,加入0.5% β-巯基乙醇,10ml 植物细胞裂解液加入50ulβ-巯基乙醇,混匀,形成植物细胞裂解液/β-巯基乙醇溶液,此溶液可2-8度保存一个月。
2. 叶片用蒸馏水清洗2-3次,滤纸吸干,有条件请用液氮研磨叶片1-2克,研磨完后,取800mg左右研磨的叶片粉,加入1.5ml预冷的植物细胞裂解液/β-巯基乙醇溶液,混匀。如果无条件(无液氮),请预冷研钵,取洗过的叶片1000 mg,用剪刀剪为碎块放入玻璃匀浆器或者研钵中。加入1.5ml预冷的植物细胞裂解液/β-巯基乙醇溶液,冰上研磨至看不见明显组织块;
3. 将研磨物放置合适的离心管,4℃,1000× g 离心5 min;
4. 将上清转移到一新的离心管中,在沉淀中加入0.5ml Lysis Buffer/β-巯基乙醇溶液,混匀,再次4℃,1000× g 离心5 min,取上清;合并两次上清,将上清4℃ 1000× g 再次离心5 min。
5.取上清,加入一新的离心管中,4℃, 16,000 × g 离心10 min。离心后的上清含胞浆成分,可从中提取胞浆蛋白。将上清转移到新离心管,线粒体沉淀在管底。
6. 在线粒体沉淀中加入0.5 mL Wash Buffer重悬线粒体沉淀,4℃,1000× g 离心5 min;
7.取上清,加入一新的离心管中,4℃, 16,000 × g 离心10 min。弃上清,高纯度的线粒体沉淀在管底;
8. 加入100ul DNA酶反应液重悬线粒体,吹打均匀后,再加入10ul DNASE I溶液(见准备工作),混匀,37℃水浴10min。此步为消化线粒体表面吸付的核DNA。4℃, 12,000 × g 离心5 min。尽可能的弃上清,再加入200ul TE 重悬线粒体沉淀,4℃, 12,000 × g 离心5 min,洗去残留的DNA酶。
9.得到的沉淀,用200ul TE缓冲液重悬线粒体沉淀,加入10ul RNase A。加入200ul线粒体裂解液,轻轻混匀(不可吹打),放置1-2min,再加入150ul蛋白沉淀液,迅速混匀。4℃, 12,000 × g 离心5 min。此步骤可进一步去除核DNA。
10.取上清,加入一新的离心管中(如用于酶切分析,可加入此步:选用等体积的酚氯仿异戊醇25:24:1抽提一次,再用氯仿抽提一次,或者直接用氯仿抽提两次,一般来说,此步可去掉一些微量蛋白及糖类,但会造成线粒体DNA的损失,因而用于PCR时可省,并不影响后续实验),加入0.6倍体积的异丙醇(如无异丙醇,可加入2.5倍体积的乙醇沉淀DNA,如离心管太满可分两管)及5-10ul 核酸核酸助沉剂,混匀,-20℃沉淀半小时左右(此步可省),4℃, 12,000 × g 离心10 min。
11. 弃上清,再加入1ml 70%乙醇清洗,4℃, 12,000 × g 离心5min。重复用70%乙醇洗一次。
12. 弃上清,再次离心1min 吸弃上清,不要碰到管底,开盖凉干约5-105min。
13.加入20-30ul TE缓冲液,轻弹管底,37℃水浴5分钟,线粒体DNA溶解。
14. 进行DNA电泳检测及-20℃保存,进行下步的实验。
四 注意事项:
1. 以离心力g计算正确的离心速度,不同的离心机可据此精确计算离心速度。
2. 进行Western Blot和2D-胶电泳,可直接在第7步的沉淀中加入上样缓冲液裂解线粒体。
3. β-巯基乙醇有毒,请注意通风及防护
一般低温度心机都有离心力显示,如果没有,可以用以下公式简单的换算。
G=1.11×(10-5)×R×[rpm]2
G为离心力,一般以g(重力加速度)的倍数来表示;
[rpm] 2即:转速的平方; R为半径,单位为厘米。
HRP-羊抗猪IgG优惠价关键词:HRP-羊抗猪IgG,XH100,百奥莱博
·抗原修复液(EDTA型)(50X)
编号:XH084
规格:100ml/500ml
产品简介:
EDTA抗原修复液(EDTA Antigen Retrieval Solution)是一种常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),从而遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。
本抗原修复液采用了广泛使用的EDTA,可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
保存条件: 2-8℃保存,一年有效。
使用说明:
使用前请用双蒸水将原液(50X)稀释50倍成(1X),1X抗原修复液为工作液
1. 对于石蜡切片:
a. 脱蜡:切片在二甲苯中脱蜡5分钟,再换用新鲜的二甲苯脱蜡,共用二甲苯脱蜡3次。无水乙醇5分钟,两次。90%乙醇5分钟,两次,70%乙醇5分钟,一次。蒸馏水5分钟,两次。
b.抗原修复:将切片浸泡在抗原修复液(1X)中,95-100℃加热约15分钟(加热时间可以控制在10-20分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1X)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2次,每次3-5分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
2. 对于冰冻切片:
用免疫染色洗涤液洗涤切片5分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1X)中,95-100℃加热约15分钟(加热时间可以控制在10-20分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1X)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2次,每次3-5分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
3. 对于其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。
HRP-羊抗猪IgG优惠价关键词:HRP-羊抗猪IgG,XH100,百奥莱博
39450-01-6 Proteinase K 蛋白酶K(原装)
9001-75-6 Pepsin 1:3000 胃蛋白酶 1:3000
BL1122 柠檬酸钠抗原修复液(1×)
ARB14239 大鼠I型胶原交联氨基末端肽(NTx)酶免分析
ARB12281 大鼠抑制素B(INH-B)尿液中含量检测 Rat inhibin b,inh-b ELISA KIT
ARB13163 小鼠载脂蛋白H(Apo-H)免费代测 Mouse apolipoprotein h,apo-h ELISA KIT
L-核糖 CTC 24259-59-4
ARB13200 小鼠脂联素(ADP)代做ELISA实验 Mouse adiponectin,adp ELISA KIT
ARB11010 人补体片断4b(C4b)酶联免疫定量检测 Human complement fragment 4b,c4b ELISA KIT
ARB11238 人毒性休克综合征毒素1(TSST-1)免费代测 Human toxic shock syndrome toxin,tsst-1 ELISA KIT
D0301 脱纤维绵羊血(无菌 pet瓶装) 100ml/200ml/500ml
PY04-020 新生霉素 2mg/支×10支 每支添加于100ml改良EC肉汤中制成mEC肉汤,用于肠出血性大肠杆菌O157;H7选择性增菌
北京百莱博科技有限公司是细胞及免疫学产品的专业生产供应销售商,恭候您的咨询选购HRP-羊抗猪IgG优惠价。
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文献和实验的histag一抗100ul/孔,ELISA板于室温振荡0.5-1小时,TPBS洗3次。很多公司都有histag的单抗,个人觉得Qiagen和Pharmacia单抗较好,Invitrogen和Labvision的一般般,一般1:1000-5000稀释,不同公司的抗体效价不同。 5.加封闭液稀释的HRP标记的羊抗鼠二抗100ul/孔,ELISA板于室温振荡0.5-1小时,TPBS洗3次。二抗很多公司有,国产的华美都可以,1:500-1000。如果是HRP标记的histag抗体,不加二抗直接显色。
( β- EP) ,再与HRP 标记的羊抗人抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物 ,经过彻底洗涤后 加 底物TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 人 β-内啡肽 ( β- EP) 呈正相关。用酶标仪在 450 nm波长下测定吸光度( OD 值), 通过标准曲线 计算样品 中 人 β-内啡肽 ( β- EP) 浓度。 试剂盒组成 :
1988年8~10月胃镜检查病人共38人,抽静脉血2ml,分离血清贮存-20℃备用。⑦阴性对照血清,进行ELISA测定,取其平均OD值作对照。⑧酶标羊抗人IgG结合物(SAHIgG—HRP)的制备:按过碘酸盐改良法,略加改进标记制成酶标抗体。即HRP8.0ml,22℃较搅20min.加乙二醇6滴,继续搅拌5min,对pH4.2,0.001mol/L醋酸盐缓冲液(用2molHC1调pH)透析过夜,中间换水4次.加羊抗人IgG(上海生物制品研究所产品)14mg,逐滴加pH,1.0mol碳酸盐缓冲液,使pH
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