虎脾脏NK细胞分离液

脾脏单个核细胞分离方法及注意事项

脾脏（spleen）位于上腹部左后侧，体积较大，长条形，是体内最大的淋巴器官，也是血流通路中的过滤器官。脾脏内定居着大量的淋巴细胞和其它免疫细胞，是机体发生特异性免疫应答的场所。 1    原理 单个核细胞的体积、形态和比重与其它细胞不同，在沉降过程中不同比重的细胞会处于不同的分布位置。因此，可利用各种血细胞和单个核细胞比重之间的差异将各种血细胞与单个核细胞分离开来。 2    方法 1）无菌条件下取出脾脏，在培养皿中加入适量的分离液，将脾脏放入细胞筛中，置于分离液中进行研磨（具体

用 CD3/CD28 做好 T 细胞激活与扩增

细胞筛网置于培养皿中，取小鼠脾脏放置于筛网中，加入 5ml 达优小鼠淋巴细胞分离液，对脾脏轻轻进行研磨（注：此步操作要快，避免分离液蒸发）； 2. 把悬有脾脏细胞的的分离液立即转移至 15ml 离心管中，随后在分离液上层轻轻覆盖 500-1000μl 的 RPMI1640 培养基（保持分离液与培养基分界明显）； 3. 室温，水平转子 800g 离心 30 分钟，设置离心机为缓升缓降； 4. 离心结束后吸出淋巴细胞层（白膜层），加入 10ml RPMI1640 洗涤一遍细胞，250g 离心 10

【进展|热点】Immunity: NKR-LTi 细胞

的固有淋巴细胞。 2、证明了NKp46+RORγt+细胞可以进一步分化为RORγt阴性的细胞，这里称为RORγt阴性的NKR-LTi细胞，这种细胞与经典的NK细胞在表型和功能上非常相似，但是在分化角度来看，是完全不同分化体系的细胞，是两群不同的细胞。所以，外周淋巴器官如脾脏和淋巴结中的CD3阴性NK1.1阳性的细胞其实包括这两种不同的细胞，而不是以往认为的就是单纯的NK细胞。 3、证明了RORγt阴性的NKR-LTi细胞是实验性固有性肠炎的主要效应细胞。 文章结构： 1、NKp46