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北京百奥莱博科技有限公司
200U/1000U/3000U
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应北京现货快速PCR扩增试剂盒折扣价,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
编号:YBP092
规格:200U/1000U/3000U
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
产品介绍:
Taq DNA Polymerase是从克隆有Thermuaquaticus DNA Polymerase基因的大肠杆菌经诱导表达后,再经三次过柱纯化分离出来的一个约94 KD的重组蛋白。无外源核酸酶和细菌DNA污染,稳定性好,特异性强,适用于各种PCR扩增。本试剂盒已经包括了PCR扩增使用的各种试剂,便于客户配套使用。使用本制品扩增得到的PCR产物的3"端附有一个A碱基,因此可直接克隆于T-Vector中。
产品特点:
快速简便;灵敏度高;特异性强;稳定性好。
产品储存:
储存在-20°C。为减少对产品稳定性的影响,可尽量避免多次冻融或存于温度变化较大的地方。
想要了解更多关于北京现货快速PCR扩增试剂盒折扣价的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销售下面的产品:
腐殖酸 Barium diphenylamine sulfonate 1415-93-6
PY08-047 HE琼脂 9CM 10皿/盒,用于分离肠道致病菌
SJ0613 UDP-glucose UDP-葡萄糖
BTN120697 青霉素G钾盐溶液 Penicillin G Potassium Solution
1069-31-4 L-鸟氨酸
BTN120508 肠激酶(轻链) Enterokinase,Light Chain
SJ0705 氨苄 100mg/ml
56-81-5 Glycerol 甘油
ARB12726 小鼠3-羟基-3甲基-戊二酰辅酶A还原酶(HMG-COA)酶免分析
2,6-二氯靛酚钠盐 L-Valine 620-45-1
苯丁酸 Carboxypeptidase B 1821-12-1
ARB13480 鸡肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)血清中含量检测 Chicken tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3,traIL-r3 ELISA KIT
E0302 抗凝绵羊血(无菌 袋装)
PY02-325 含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆琼脂 250克
7647-14-5 Sodium Chloride 氯化钠
北京现货快速PCR扩增试剂盒折扣价关键词:快速PCR扩增试剂盒,YBP092,百奥莱博
·胚乳组织及丝状真菌超纯RNA快速提取试剂盒
编号:YBP005
规格:20次/50次
适用范围:
适用于从胚乳组织和丝状真菌材料中提取无基因组DNA污染的高纯度的总RNA。
本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项:
1.所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使用,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清。
2.不合适的储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍:
独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,植物RNA助提剂PLANTaid帮助结合多糖多酚并通过离心去除,然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从玻璃纤维膜上洗脱。
产品特点:
1.离心吸附柱内玻璃纤维膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚,氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。
4.独有的植物RNA助提剂可以有效结合多糖多酚,提高清除效果。
5.基因组DNA清除柱可以有效的消除基因组DNA的污染。
6.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
注意事项
1.所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到12,000 rpm的传统台式离心机。
2.需要自备乙醇, β-巯基乙醇,一次性注射器(可选),研钵。
3.裂解液RLCplus2 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4.RNA 纯度及浓度检测:
完整性: RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳 (电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE电泳缓冲液;150v,15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA,电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb,分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中最大rRNA 亮度应为次大rRNA亮度的1.5-2.0 倍,否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯 度:OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA,OD260/OD280 读数(10mMTris, pH7.5)在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品,假定在10mM Tris,pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间,在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9 之间,但这并不表示RNA 不纯。
浓 度:取一定量的 RNA 提取物,用RNase-free 水稀释n 倍,用RNase-free水将分光光度计调零,取稀释液进行OD260, OD280 测定,按照以下公式进行RNA浓度的计算:终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数n)×40
操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)
提示:
第一次使用前请先在漂洗液RW瓶中加入指定量无水乙醇!
操作前在裂解液RLCplus2中加入β-巯基乙醇至终浓度1%,如1 ml RLCplus2中加入10μl β-巯基乙醇。此裂解液最好现用现配。配好的RLCplus2 4℃可放置一个月。
1.直接研磨法(推荐):
a. 新鲜胚乳组织或丝状真菌称重后取100mg迅速剪成小块放入研钵(冰冻保存或者液氮保存样品可直接称重后取100mg放入研钵), 加入10体积(1ml)RLCplus2(请确定已加入β-巯基乙醇)和1体积(100μl) PLANTaid 室温下充分研磨成匀浆,注意应该迅速研磨让组织和裂解液RLCplus2立刻充分接触以抑制RNA酶活性。
b. 将裂解物转入离心管,剧烈摇晃振荡15秒,12,000rpm离心5-10分钟,沉淀不能裂解的碎片和结合有多糖多酚的PLANTaid,将所有裂解物上清转移至一个基因组DNA清除柱中(清除柱放入收集管中),12,000rpm离心30~60秒,收集滤液。接下步骤3
2.液氮研磨法:
a.取500μl裂解液RLCplus2(已经加入β-巯基乙醇),转入1.5ml离心管中,加入50μl PLANTaid混匀备用。
b.液氮中研磨适量胚乳组织或丝状真菌成细粉后,取50mg细粉转入上述装有RLCplus2和PLANTaid的离心管, 立即用手剧烈振荡20秒,充分裂解。
c.用带钝针头的一次性 1 ml(配0.9mm针头) 注射器抽打裂解物 10 次或直到得到满意匀浆结果(或者电动匀浆30秒),可以剪切DNA,降低粘稠度和提高产量。
d.将裂解物12,000rpm离心5-10分钟,沉淀不能裂解的碎片和结合有多糖多酚的PLANTaid, 将所有裂解物上清转移至一个基因组DNA清除柱中(清除柱放入收集管中),12,000rpm离心30~60秒,收集滤液。接下步骤3
3.较精确估计所收集的滤液体积,加入0.5体积的无水乙醇,此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程,立即吹打混匀,不要离心。将混合物(每次小于700μl,多可以分两次加入)加入一个吸附柱RA中,(吸附柱放入收集管中)12,000 rpm离心60秒,弃掉废液。
4.向吸附柱RA中加500μl 去蛋白液RW1,室温放置30秒,12,000rpm 离心30秒,弃掉废液。
5.向吸附柱RA中加入500μl漂洗液RW(请先检查是否已加入无水乙醇!),12,000 rpm 离心30秒,弃掉废液。加入500μl漂洗液RW,重复一遍。
6.将吸附柱RA放回空收集管中,12,000 rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
7.取出吸附柱RA,放入一个RNase free离心管中,根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加30-50μl RNase free water(事先在 70-90℃水浴中加热效果更好), 室温放置1分钟,12,000 rpm 离心1分钟。
8.如果预期RNA产量>30μg,加30-50μl RNase free water重复步骤7, 合并两次洗脱液,或者使用第一次的洗脱液加回到吸附柱重复步骤一遍(如果需要RNA浓度高)。
洗脱两遍的RNA洗脱液浓度高,分两次洗脱合并洗脱液的RNA产量比前者高15–30%,但是浓度要低,用户根据需要选择。
附录:DNase I柱上消化
一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留,本公司的EASYspin系列RNA提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜,避免了大部分的DNA残留,此外,本试剂盒中配备的基因组DNA清除柱也可以有效的消除基因组DNA的污染。然而,由于材料的差异,某些材料也许基因组残留会非常明显,或者加入的裂解液和材料的起始量没有很好比例时,即使通过基因组DNA清除柱也会有没有完全消除掉基因组DNA的污染的情况,尽管在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA残留(一般电泳EB染色不可见)影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA表达量分析如荧光定量PCR,此时可用RNase free DNaseI直接在离心吸附柱子RA上面消化DNA,然后纯净RNA可以洗脱下来直接使用。
DNase I 工作液的配制:
取10x DNase I buffer 8μl ,加入 DNAse I 3μl(15U),RNAse 抑制剂10U(可加可不加,建议加),无核酸酶水补足至80μl,轻柔混匀。
DNase I柱上消化操作步骤:
1.前面按照正常步骤操作,在操作步骤4加入去蛋白液RW1步骤前按照以下步骤操作。
2.向吸附柱RA 中加入350 μl 去蛋白液RW1,12,000 rpm 离心30-60 秒,弃废液,将吸附柱放回收集管中。
3.向吸附柱RA 中央加入80μl 的DNase I 工作液,室温放置15 分钟。
4.向吸附柱RA 中加入350 μl 去蛋白液RW1, 12,000 rpm 离心30-60 秒,弃废液,将吸附柱放回收集管中。
5.接操作步骤5中加入漂洗液RW步骤等后续步骤。
北京现货快速PCR扩增试剂盒折扣价关键词:快速PCR扩增试剂盒,YBP092,百奥莱博
·琼脂糖亲和介质(蓝胶)
编号:YBP174
规格:5ml/50ml/250ml/500ml
产品介绍:
琼脂糖亲和介质(谷胱甘肽)是专门设计用于分离纯化不同来源(如胎盘、肝脏、胞液、大片吸虫、昆虫、血吸虫、玉米螟等)的谷胱甘肽S-转移酶、谷胱甘肽S-转移酶的重组融合蛋白和依赖S-转移酶或谷胱甘肽的蛋白,一步分离即可得到高纯度的目标蛋白,操作条件温和,有利于保持蛋白活性。
肝素(Heparin)是一种含硫酸酯的酸性多糖,能和抗凝血因子III、凝血酶、类凝血酶、人凝血因子IX、XI和VIII,也能和大肠杆菌表达的人白介素、人前列腺生长因子、重组人血管内皮生长因子 、软骨生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、重组人酸性成纤维细胞生长因子、重组肝细胞生长因子、重组鼠肝素辅因子II、重组人血小板第四因子、重组人内皮抑素、重组人角质细胞生长因子等生物大分子结合,所以肝素亲和介质可以用于这类物质的纯化。
琼脂糖亲和介质(Ni)属于一类金属螯合介质,它是将亚氨基二乙酸(IDA)键合在高流速琼脂糖微球上,并螯合金属离子Ni2+而形成的一种亲和层析介质。该亲和介质不仅具有吸附容量大、选择性好、通过性强、易于再生、成本低等优点,还有利于保持产品的生物活性和提高产品的收率,从而广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化,尤其是组氨酸标记蛋白质的高效制备。Protein A能特异性地与抗体的Fc区结合,所以Protein A亲和介质可用于抗体(单抗或多抗)的分离纯化,经过一步亲和层析,即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体。
产品储存:
谷胱甘肽琼脂糖凝胶在4-8°C下20%乙醇中保存;肝素琼脂糖凝胶在4-8°C下0.05M乙酸钠+20%乙醇中保存;镍琼脂糖凝胶在4-8°C下20%乙醇中保存;Protein A琼脂糖凝胶在4-8°C下20%乙醇中保存。
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