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北京百奥莱博专业生产销售YBP002型EASYspin组织/细胞超纯RNA快速提取试剂盒,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
YBP002型EASYspin组织/细胞超纯RNA快速提取试剂盒
编号:YBP002
规格:20次/50次/100次
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
适用范围:
适用于从组织或细胞样品中提取无基因组DNA污染的总RNA。
储存事项:
1.所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使用,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清。
2.不合适的储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍:
独特的裂解液RLTplus2迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,基因组DNA在高离序盐条件下结合到基因组DNA清除柱上,未结合的总RNA然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内玻璃纤维膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净的RNA从玻璃纤维膜上洗脱。
产品特点:
1.离心吸附柱内玻璃纤维膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚,氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在45分钟内完成。
4.基因组DNA清除柱可以有效的消除基因组DNA的污染。
5.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
注意事项
1.所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到12,000 rpm的传统台式离心机。
2.需要自备乙醇, β-巯基乙醇,一次性注射器(可选),研钵。
3.裂解液RLTplus 2和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)
提示:
第一次使用前请先在漂洗液RW瓶中加入指定量无水乙醇!
操作前在裂解液RLTplus2中加入β-巯基乙醇至终浓度1%,如1 ml RLTplus2 中加入10μl β-巯基乙醇。此裂解液最好现用现配。配好的RLTplus2 4℃可放置一个月。
1.组织培养细胞
a.收集<107悬浮细胞到一个1.5ml离心管,对于贴壁细胞,孔板培养可以直接裂解,细胞瓶培养应该先用胰蛋白酶消化后吹打下来收集。
b.12,000rpm离心10秒(或者300g离心5分钟),使细胞沉淀下来。完全吸弃上清,留下细胞团,注意不完全弃上清会稀释裂解液导致产量纯度降低。
c.轻弹管壁将细胞沉淀完全松散重悬,加入350μl(<5x106细胞)或者600μl(5x106-1x107细胞)裂解液RLTplus2(请确定已加入β-巯基乙醇),吹打混匀后用手剧烈振荡20秒,充分裂解。
d.将所有裂解物上清转移至一个基因组DNA清除柱中(清除柱放入收集管中),12,000rpm离心30~60秒,收集滤液。接下步骤3
2.动物组织(例如鼠肝脑)
a.电动匀浆:新鲜组织用解剖刀迅速切成小碎块,加入350μl(<20mg组织)或者600μl(20-30mg组织)的裂解液RLTplus2后电动彻底匀浆20-40秒。
b.液氮研磨+匀浆:在液氮中研磨组织成细粉后,取适量组织细粉(20mg/30mg)转入装有350μl/600μl组织裂解液RLTplus2的1.5ml离心管中, 用手剧烈振荡20秒,充分裂解。
c.将匀浆后裂解物12,000rpm离心3分钟,沉淀可能存在的裂解困难的碎片或者不溶物, 将裂解物上清小心转到一个新离心管。
d.所有裂解物上清转移至一个基因组DNA清除柱中(清除柱放入收集管中),12,000rpm离心30~60秒,收集滤液。接下步骤3
3.较精确估计所收集的滤液体积,加入0.5体积的无水乙醇,此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程,立即吹打混匀,不要离心。将混合物(每次小于700μl,多可以分两次加入)加入一个吸附柱RA中,(吸附柱放入收集管中)12,000 rpm离心60秒,弃掉废液。
4.向吸附柱RA中加500μl 去蛋白液RW1,室温放置30秒,12,000rpm 离心30秒,弃掉废液。
5.向吸附柱RA中加入500μl漂洗液RW(请先检查是否已加入无水乙醇!),12,000 rpm 离心30秒,弃掉废液。加入500μl漂洗液RW,重复一遍。
6.将吸附柱RA放回空收集管中,12,000 rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
7.取出吸附柱RA,放入一个RNase free离心管中,根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加30-50μl RNase free water(事先在 70-90℃水浴中加热效果更好), 室温放置1分钟,12,000 rpm 离心1分钟。
8.如果预期RNA产量>30μg,加30-50μl RNase free water重复步骤7, 合并两次洗脱液,或者使用第一次的洗脱液加回到吸附柱重复步骤一遍(如果需要RNA浓度高)。
洗脱两遍的RNA洗脱液浓度高,分两次洗脱合并洗脱液的RNA产量比前者高15–30%,但是浓度要低,用户根据需要选择。
我公司的YBP002型EASYspin组织/细胞超纯RNA快速提取试剂盒,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销售下列产品:
·RNAsafe 高效RNase灭活剂
编号:YBP064
规格:1ml/5ml
产品储存:-20°C保存半年以上。
产品介绍:
RNAsafe含有数种特殊化合物, 可使RNase失活,高效去除各种溶液或者反应缓冲液中可能存在的RNase污染,从而防止RNA的降解。RNAsafe可用于制备RNA悬浮液, 并可加入到各种RNA的反应液中(如体外转录、逆转录、RT-PCR、探针制备、分子杂交、NucleaseProtect ion Assay等), 灭活可能存在的微量RNase污染, 以增进RNA稳定性, 获得更佳实验结果。
产品特点:
• 适用性广:适合于各种缓冲液, 包括不能由DEPC处理的Tris及MOPS缓冲液系统等。
• 安全, 方便地去除溶液中微量的RNase。
• 使用灵活:处理过的溶液随时可以再处理(60°C 10-20分钟), 以去除任何可能发生的后续RNase污染。
• 不影响逆转录酶、RNA聚合酶和耐热DNA聚合酶的活性, 可用于逆转录和体外转录反应。
• 操作简便: 处理后不需高压灭菌。
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·组织/细胞基因组DNA快速提取试剂盒(不含蛋白酶K)
编号:YBP021
规格:200次
产品介绍:
独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶, 然后基因组DNA在高盐状态下选择性吸附于离心柱内玻璃纤维素膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物、 蛋白等杂质去除, 最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从玻璃纤维素膜上洗脱。
产品特点:
• 重现性好: 离心吸附柱内玻璃纤维素膜全部采用进口特制吸附膜, 柱与柱之间吸附量差异极小, 可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
• 操作安全:不使用有毒的苯酚等试剂, 也不需要乙醇沉淀等步骤。
• 快速简捷, 单个样品操作一般可在30分钟内完成。
• 多次过柱漂洗可确保高纯度,OD2 6 0/OD280典型的比值达1 .7-1 .9, 长度可达30kb-50kb, 可直接用于PCR、Southrn-blot和各种酶切反应。
适用范围:适用于快速提取各种动植物细胞/组织基因组DNA。
产品储存:
• 结合液CB或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀, 可在37°C水浴几分钟帮助重新溶解, 恢复澄清透明后冷却至室温即可使用。
• 为避免降低活性、方便运输,提供蛋白酶K为冻干粉状。收到后可短暂离心,加入1ml 灭菌ddH2O溶解,因为反复冻融可能会降低酶活性, 因此溶解后立即按照每次使用量(20μl)分装, -20°C保存。
• 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、 氧化、 pH值变化, 各溶液使用后应及时旋紧盖子。
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PY08-064 脑心浸出液肉汤(BHI) 5ml 10支/盒,用于链球菌及其他对营养苛求菌的培养
ARB11751 人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)elisa检测 Human eosinophil cationic protein,ecp ELISA KIT
BL1279 1×PBS,PH7.2-7.4,0.01M,细胞培养级
ARB12058 大鼠上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)elisa检测操作说明书 Rat epithelial neutrophil activating Peptide 78,ena-78 ELISA KIT
ARB11920 人髓样分化因子初次应答基因88(MYD88)Elisa分析 Human myeloid differentiation primary response gene 88,myd88 ELISA KIT
BL0805 山羊IgG抗原干粉(原装)
ARB12473 大鼠胎盘生长因子(PLGF)酶标法分析 Rat placenta growth factor,plgf ELISA KIT
J0201 兔抗牛血清白蛋白抗血清 1ml/10ml
ARB13084 小鼠组织因子途径抑制物(TFPI)检测服务 Mouse tissue factor pathway inhibitor,tfpi ELISA KIT
胞嘧啶 Oil red O 71-30-7
ARB13773 银环蛇毒素α(α-BGT)elisa检测 α-bungarotoxin,α-bgt ELISA KIT
PY02-361 七叶苷培养基 10克
ARB13395 羊口蹄疫抗体(O型)elisa检测操作说明书
9001-05-2 Catalase 过氧化氢酶(牛肝)
ARB11705 人晶体蛋白α(Cryα)定量分析 Human crystal proteins α,cryα ELISA KIT
C0201 特级新生牛血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
金属硫蛋白 Validamycin
ARB12321 大鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)血清中含量检测 Rat glutamic acid decarboxylase autoantibody,gad-ab ELISA KIT
987-65-5 三磷酸腺苷二钠 ATPNa2
焦磷酸四苄酯 Triisoamylamine 990-91-0
CBZ-L-亮氨酸 Chlormequat chloride 2018-66-8
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