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- 2025年12月08日
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文献和实验在LIF存在的条件下维持细胞培养 第2步：EB培养基 使用细菌培养皿去除LIF后胚状体的形成需要4天。 1、分散纯化细胞（参见上面的细胞传代部分） 2、纯化2小时后将细胞转入含有ES培养基的50ml Falcon管中，计数细胞取适量体积放入15ml管中离心3分钟。 3、用2mlEB培养基重悬细胞，吹打至少10次制成单细胞悬液 4、一个15cm的细菌培养皿接种4～5×106个细胞（1个完全融合的组织培养皿通常足以接种4个同样规格的细菌培养皿）。 5、2天后更换
ml Falcon管中，计数细胞取适量体积放入15ml管中离心3分钟。 3．用2mlEB培养基重悬细胞，吹打至少10次制成单细胞悬液 4．一个15cm的细菌培养皿接种4～5×106个细胞（1个完全融合的组织培养皿通常足以接种4个同样规格的细菌培养皿）。 5．2天后更换培养基 将胚状体转入锥形管中放置3～5分钟使细胞沉降。弃去上清，将细胞重悬于新鲜培养基并接种在新的细菌培养皿中。 6．用EB培养基培养的第4天将细胞转入没有包被的组织培养皿中（这即是细胞的移植步骤）。1个组织培养皿
的细胞传代部分） 2．纯化2小时后将细胞转入含有ES培养基的50ml Falcon管中，计数细胞取适量体积放入15ml管中离心3分钟。 3．用2mlEB培养基重悬细胞，吹打至少10次制成单细胞悬液 4．一个15cm的细菌培养皿接种4～5×106个细胞（1个完全融合的组织培养皿通常足以接种4个同样规格的细菌培养皿）。 5．2天后更换培养基 将胚状体转入锥形管中放置3～5分钟使细胞沉降。弃去上清，将细胞重悬于新鲜培养基并接种在新的细菌培养皿中。 6．用EB培养基培养的第4天将
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