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百奥莱博专业生产销售UltraECL底物化学发光检测试剂盒 蛋白质研究,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
UltraECL底物化学发光检测试剂盒 蛋白质研究
规格:50ml(A液B液各25ml)|100ml(A液B液各50ml)|500ml(A液B液各250ml)
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:PP2401
产品介绍:
Western blot底物发光检测试剂可由标记于二抗上的辣根过氧化酶催化,产生化学发光反应,可以灵敏地检测出目的蛋白的存在。UltraECL底物化学发光检测试剂盒基于新一代增强型化学发光底物研制而成,并对成份做了优化。产品背景低,稳定性好,比普通ECL试剂敏感度高数十倍。它由辣根过氧化物酶(HRP)催化发生化学反应,发出荧光,可对X光胶片曝光,也可直接进行luminometer检测或者荧光CCD扫描。
操作步骤:
1.按常规Western blot操作,二抗孵育后,进行最后一次洗涤时,根据膜的大小,按每10cm2膜混合0.5ml溶液A和0.5ml溶液B,混匀,配制成发光检测工作液。
2.用平头镊子将膜取出,膜的下缘轻轻接触吸水纸,以去除膜上多余的液体。膜的蛋白面朝上,置于洁净保鲜膜(某些市售保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光,应选择高质量保鲜膜)上。用吸管将配制的发光检测液转移到蛋白膜上,使其均匀覆盖,室温孵育1-2分钟。
3.用平头镊夹持蛋白膜,膜的下缘轻轻接触吸水纸,以去除膜上多余的液体。膜的蛋白面朝上,包裹于洁净保鲜膜内。轻轻赶出其间的气泡,固定在X片暗盒内。
4.在暗室中取一张X片置于包裹的膜上,合上暗盒,曝光30秒至1分钟。立即显影定影,根据其曝光强度,缩短或延长下一张X片的曝光时间(对微弱信号,曝光时间可延长至数小时),或者曝光0.5,1,2,4,6分钟一系列后再显影定影挑选一张满意的。也可用合适的照相器材直接记录蛋白膜的化学发光图像。
注意:如果储存使用时间过长,溶液B 中过氧化氢可能随时间分解降低曝光敏感度,可取普通纯水按照每10ml 纯水加入40μl 30%H202(商品化的H202 一般为30%)比例配成新鲜H202 溶液替代溶液B 使用,可以完全恢复发光工作液最大发光敏感度,效果和新鲜的溶液B 完全一样。
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