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- 2025年07月13日
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56
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子科生物
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100微升
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美国GENMED主要运用世界上最尖端的基因综合技术平台(数字化染色体基因型完全分析技术、表观基因组完全分析技术、染色体单体分离分析技术、基因靶标技术、全基因表达完全分析技术、RNA拼接图谱综合分析技术、SiRNA完整表达文库构建技术、细胞抗原谱学技术、胶体金层析法金标技术、蛋白激酶组学完全分析技术、蛋白表位标记技术、Seldi蛋白质谱分析技术、高容量细胞荧光筛选技术、高通量远红外细胞免疫筛选技术),从事疾病指纹诊断系统、农作物种子改造和分子操作、生物反应器、中草药和海洋生物抗肿瘤活性物质筛选、基因检测中心、技术平台服务和培训等独步天下的杰美产品和服务体系的开发，以期成为基因医学产业化的领军企业。
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文献和实验,产生约15000种不同的mRNA分子.可见,由mRNA出发的cDNA克隆,其复杂程度要比直接从基因组克隆简单得多。 cDNA文库在研究具体某类特定细胞中基因组的表达状态及表达基因的功能鉴定方便具有特殊的优势，从而使它在个体发育、细胞分化、细胞周期调控、细胞衰老和死亡调控等生命现象的研究中具有更为广泛的应用价值，是研究工作中最常使用到的基因文库。 原理 经典cDNA文库构建的基本原理：用Oligo（dT）作逆转录引物，或者用随机引物，给所合成的cDNA 加上适当的连接
。 (5)未标记的dNTP 溶液：dGTP、dCTP 和dTTP 溶液，各5mmol/L。 [α-32 P] dATP：比活性>3000Ci/mmol, 10μCi/μl。 (7)缓冲液A：50mmol/L Tris?Cl （pH7.5）; 50mmol/L NaCl; 5mmol/L EDTA （pH8.0）; 0.5% SDS。 操作步骤: (1) 200ng 双链DNA(1μl)和7.5ng 随机引物(1μl)混合后置于eppendorf 管内,水浴煮沸5 分钟后，立即
得特异活性掺入，干燥后就可激发荧光，从而简化了图象获取过程。我们取得良好结果的其它荧光染料包括R110 (Perkin Elmer)、TAMRA (Perkin Elmer)和SpectrumOrange(Vysis)。 oligo-dT和随机引物逆转录标记：所有试剂应经过灭菌及DEPC处理。RNA溶于10µl水中，该溶液应包括一些对照RNA(参见本文后半部分)。加2.5µl(6µg)引物(20-mer oligo-dT，anchored oligo-dT，random hexamer
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