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文献和实验科研君们，当埋头实验几月找到了目标基因片段，电泳时条带却突然消失了；千辛万苦分离纯化的物质，色谱图中却意外出现杂质峰，苦苦查询，可能仍找不到问题原因。若问题只在小小的吸头上，科研君的心还能淡定吗？ 吸头的问题在哪里，如何保证纯净无污染的吸头？需要考虑以下几方面因素： 一、 吸头材质 吸头市场上，原材料基本都是聚丙烯塑料（低吸附，化学惰性高，使用温度范围广，无色透明）。也许大家不知道的是，同样是聚丙烯，品质会有大的差别。高品质的吸头一般采用天然 100% 纯聚丙烯，而低廉的吸头则很多
）。4.培养时间。200ul的培养液对于10的4～5次方的增殖期细胞来说，很难维持68h，如果营养不够的话，细胞会由增殖期渐渐趋向G0期而趋于静止，影响结果，我们是在48h换液的。5.MTT法只能测定细胞相对数和相对活力，不能测定细胞绝对数。做MTT时，尽量无菌操作，因为细菌也可以导致MTT比色OD值的升高。6.理论未必都是对的。要根据自己的实际情况调整。7.实验时应设置调零孔，对照孔，加药孔。调零孔加培养基、MTT、二甲基亚砜。对照孔和加药孔都要加细胞、培养液、MTT、二甲基亚砜，不同的是对照孔加溶解
(6)个，反复吹打，溶解均匀细胞（轻吸，不要倒吸倒棉花上，初次就选用大的吸管） 3. 带双层手套，混合好的样品全部移置到0.1ml的EP管中，室温15－30度静置5分钟 4. 加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,盖好EP管，剧烈振荡（上下颠倒），15秒钟，室温静置2－3min 5. 2－8度，离心，10500rpm/min，15min,取上清，用200ul在20ul刻度使用，小心不要使界面混淆，剩余界面上不要） 6. 上清中加入等量的异丙醇(一般是0.5:1),颠倒5次（用200ul枪加
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