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文献和实验采用回收的聚丙烯(这种情况下,我们只能说它的主要成分是聚丙烯),这类吸头一般柔软性很差,吸头壁较厚。而柔软性差的吸头容易导致吸头与移液器的密封一致性差;吸头壁厚则容易使液体残留,且排液不灵活。 二、 吸头的制造和生产工艺 除了吸头原材料之外,大多数吸头在制造的过程中还会加入显色材料和少量的添加剂,比较常见的有: 1. 显色材料。市场上俗称的蓝色吸头(1000μL)和黄色吸头(200μL),就是在聚丙烯中加入了相应的显色材料。显色材料需要用高品质的色母粒,而非低廉的工业
)。4.培养时间。200ul的培养液对于10的4~5次方的增殖期细胞来说,很难维持68h,如果营养不够的话,细胞会由增殖期渐渐趋向G0期而趋于静止,影响结果,我们是在48h换液的。5.MTT法只能测定细胞相对数和相对活力,不能测定细胞绝对数。做MTT时,尽量无菌操作,因为细菌也可以导致MTT比色OD值的升高。6.理论未必都是对的。要根据自己的实际情况调整。7.实验时应设置调零孔,对照孔,加药孔。调零孔加培养基、MTT、二甲基亚砜。对照孔和加药孔都要加细胞、培养液、MTT、二甲基亚砜,不同的是对照孔加溶解
(6)个,反复吹打,溶解均匀细胞(轻吸,不要倒吸倒棉花上,初次就选用大的吸管) 3. 带双层手套,混合好的样品全部移置到0.1ml的EP管中,室温15-30度静置5分钟 4. 加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,盖好EP管,剧烈振荡(上下颠倒),15秒钟,室温静置2-3min 5. 2-8度,离心,10500rpm/min,15min,取上清,用200ul在20ul刻度使用,小心不要使界面混淆,剩余界面上不要) 6. 上清中加入等量的异丙醇(一般是0.5:1),颠倒5次(用200ul枪加
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