Western Blot技术服务

服务简介

Western blot技术的一般步骤是将经过SDS-PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。由于Western blot检测技术结合了凝胶电泳的高分辨率和固相免疫测定的特异敏感等多种特点，因此可检测到1-5 ng (最低可到10-100 pg)中等大小的靶蛋白。同时，Western blot技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。

应用范围

1、半定量或定性检测细胞或组织中目标蛋白的表达情况；

2、从蛋白质混合物中检出目标蛋白质；

3、蛋白-蛋白、蛋白-DNA和蛋白-RNA相互作用的后续分析，并结合组分分离技术，检测目标蛋白的定位情况，为免疫荧光实验的补充；

4、在后基因组时代，将与质谱和蛋白质芯片等其他技术一起相互配合，发挥更重要的作用。

服务流程

Western Blot是用抗体检测蛋白的重要方法之一。Western Blot的操作步骤主要包括：蛋白样品收集，电泳，转膜，封闭，一抗孵育，二抗孵育，底物显色等过程。

服务特点

1、高分辨率：可检测到低至1-5ng靶蛋白；

2、高灵敏度：特异敏感抗原-抗体反应；

3、高准确度：与内参蛋白比较靶蛋白的相对含量。

服务内容及结果

〖内容〗

1、样品蛋白制备（客户可自己提供）

2、蛋白变性电泳

3、抗体标记

4、结果检测

〖结果〗

1、原始数据

2、实验报告（详细的实验方法、蛋白定量结果、WB胶片）

〖示例〗

客户提供

1、详细的背景资料，包括蛋白的种属、大小、参考文献等。

2、 新鲜样品（组织为100-150 mg/样，细胞>107个/样），若为冻存样品，请于-70 ℃以下保存并自备干冰以便运输。

3、一抗，并标明来源和稀释度，也可让我公司代买；为保证质量，抗体最好为进口单克隆抗体。

服务承诺

1、会在最短时间内快速完成实验

2、保证实验结果准确、客观、可信。