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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20 °C
- 保质期:
1年
- 英文名:
Caspase-3(CPP32)
- 库存:
66
- 供应商:
子科生物
- 规格:
0.5毫克/1毫克
抗体的保存建议:
抗体保存得当与否直接决定了抗体的活性和使用效果。如果抗体保存得当,大部分抗体活性都可以维持数月甚至数年。请按照说明书或者抗体标签上推荐的保存条件正确保存抗体!无论是保存还是运输,绝对避免反复冻融抗体!
1、拿到抗体后请务必在1000-3000转离心1-2分钟后再打开管盖进行分装和保存!(由于运输过程中反复颠簸,管内微量抗体容易聚集在管盖处,一旦直接打开容易流失抗体。请放心抗体出厂时保证已装入足量。)
2、对于大部分抗体,比较合适的保存方式是分装后保存在-20℃冰箱。
▶分装可以最大程度降低反复冻融对抗体活性的损害,同时也降低了多次从同一管中吸取抗体造成污染的可能性。
▶分装的量以一次实验用完为好,但建议最少不要少于10μL每份。分装体积越小,抗体浓度可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响,同时分装次数越多移液吸头吸附的抗体也越多,可能会误认为抗体没有足量装入。(最好用无菌的进口0.2ML离心管来分装抗体,国产的小管一般没有经过很好的硅化处理,容易吸附抗体蛋白,影响抗体活性。)
▶分装时请将无菌的微量移液器吸头先插入管底部反复吹打几次后再吸出抗体,以便抗体有效成分与抗体保护剂充分混匀。
▶复融后的分装抗体如果一次用不完,请将剩余母液保存在4℃冰箱,避免再冻起来!
▶绝对避免将抗体保存在自动除霜冰箱的冷藏室中。尽量将抗体保存在手动除霜冰箱里面,而不是在冰箱门上。
3、大部分抗体收到后4℃短暂保存1-2周对抗体活性是基本没有影响的。如果抗体很快(1-2周内)就能使用完,推荐在4℃保存,避免反复冻融对抗体活性的损害。如果要长期保存则分装后-20℃保存。
4、即用型抗体请务必保存在4℃冰箱,一定不能冷冻保存。
5、特殊抗体的保存:
▶酶联抗体:一般保存在4℃,尽量避免冷冻起来。否则可能会导致酶活力的下降或者丧失。
▶偶联抗体:所有偶联抗体需要4℃避光保存。尤其是荧光标记抗体,对光极为敏感,因此所有实验阶段也是要避光操作的。
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文献和实验Caspase-3(CPP-32,Apoptain,Yama,SCA-1),半胱天冬酶家族成员之一,是凋亡的关键执行者,对许多关键的蛋白起着部分或全部的裂解作用,如核酶多聚(ADP-ribose)聚合酶(PARP)[1] 及众多细胞骨架相关的蛋白、激酶以及 Bcl-2 家族中凋亡相关的蛋白等[2] 。Caspase-3 在肺、脾脏、心脏、肝脏、肾脏等中广泛表达,在大脑和骨骼肌中表达量稍低,在睾丸中表达量最低。同时在许多细胞系中都有发现 caspase-3 的表达,其中免疫相关的细胞中表达量最高
凋亡过程。 (二)caspase-3 1994年Fernandez-Alnemri等在BenBank表达序列标记(expression sequence tag, EST)数据库中找到一段ICE/CED-3活性中心同源的序列,用它合成探针后,筛选人Jurkat T淋巴细胞cDNA文库,从中克隆到一种新基因,因其编码分子量为32kD的半胱氨酸蛋白酶而称之为CPP32(cysteine protease protein, 32kD)。随后,其它学者独立地将这一蛋白
Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大亚基(17KD)和两个小亚基(12KD)组成,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞,caspase-3的活性明显下降。1、Western blot 分析Procaspase-3的活化,以及活化
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