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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
78
- 供应商:
深圳子科生物
- 检测范围:
详情咨询在线客服
- 检测方法:
酶联免疫分析ELISA方法
- 应用:
仅供科研研究实验
- 规格:
96孔
试剂盒未提供的材料
1、蒸馏水或无离子水
2、甲醇
3、量筒100ml
4、烧杯(样品提取和收集)
5、滤纸Whatman GF/ A or equivalent
6、移液器 50 μL
7、50 和100 μL8道移液器
8、吸水纸
9、450nm酶标仪
10、计时器
11、混合器
样品制备:
1、研磨样品,用20目筛过滤,不马上使用的样品要放在冰箱储存。
2、在烧杯中称量50g样品和5g NaCl。
3、并加入100ml 80%的甲醇水溶液,密封放置。
4、剧烈震荡1分钟。
5、用Whatman GF/A滤纸过滤至少10ml样品处理液,然后转移到一个新的干净的容器中。
6、用20ml的水稀释5ml的提取液。
操作步骤:
注意:标准和样品做平行可以增加精密度和准确度
1.使用前将试剂盒和样品处理液提前从冰箱中拿出来使其达到室温。
2.从铝箔袋中拿出要求数量的微孔条,放入干燥剂并重新封好袋子以免微孔条受潮。
3.每个测试孔都加入50 μL酶结合物
4.在对应的微孔中加入50μL的标准和样品,确保吸头要干净。
5.每个测试孔都加入50 μL抗体溶液
6.孵育10分钟
7.孵育完成后,将微孔中的溶液倒入水槽中,用自来水加满微孔然后倒掉,重复四次,总共五次洗板。
8.最后一次洗板后要拍板,去掉残留的洗液。
9.每个测试孔加入100μL底物。
10.孵育10分钟
11.每个测试孔加入100μL终止液。
12.450nm 下读取每个孔的吸光度值(OD)。
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文献和实验人转录因子E2F1 ( E2F1 )ELISA 试剂盒 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 E2F1 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 E2F1与单抗结合,加入生物素化的抗人 E2F1 ,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的 Streptavidin 与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在 450nm 处测 OD 值,E2F1 浓度与 OD 值成正比
产生假阳性反应。一般说来,在 3 天内测定的血清标本可放置于 4℃,超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。 2. 试剂的准备 按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。 ELISA 中用的蒸馏水或去离子
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using Phospho-p38 and Total-p38 antibodies (C). Cell-Based Elisa将小鼠巨噬细胞4/4细胞种在96孔板内,每个孔种5 x 104 cells/cm2细胞。细胞用不同浓度的anisomycin刺激,我们来监测P38 MAPK和JNK两种蛋白的变化。按照试剂盒的实验步骤,分别固定,打孔,猝灭,封闭,然后一抗孵育,二抗孵育,最后显色,用常规的酶标仪读取数值。最后数据再和试剂盒提供的结晶紫核染料结果做纠正,最后得出以上数据。Quantitative
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