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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
78
- 供应商:
子科生物
- 检测范围:
详情咨询在线客服
- 检测方法:
酶联免疫分析ELISA方法
- 应用:
仅供科研研究课题
- 适应物种:
小鼠
- 标记物:
详情咨询在线客服
- 样本:
小鼠鼠血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等
- 规格:
96T/48T
产品参数介绍:
●规格: 96T/48T
●反应时间: 1-5h
●所需样本体积: 50-100ul
●检测波长: 450 nm
●用途: For research use only. Not for diagnostic use.
●特点:灵敏性高、特异性强、重复性好
●服务:子科生物所有的elisa试剂盒均可免费代测,全程Elisa实验技术指导。
深圳子科生物自主研发酶联免疫分析检测试剂盒,品牌为ZIKER,可以检测 Human,Rat、Mouse、Porcine、Sheep、Monkey、Goat、Bovine、Canine、Rabbit、Chicken、Duck、Fish、Plant 等各种样本,品种齐全,质量保证,免费代测、技术全程支持服务,我公司长期跟各大高校科研实验室保持课题合作,经验丰富,质量稳定!我们所有的产品都是我司直接供货,无中间差价,直接供货,让您以优惠的实验预算完成您的实验!
小鼠钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)ELISA检测试剂盒
预期应用:ELISA法定量测定相关血清、血浆或其它相关液体中的含量/活性。
标本的采集及保存:
1.血清:标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
操作步骤
各试剂在使用前平衡至室温。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。除空白孔外,余孔分别加标准溶液或待测样品100ul,注意不要有气泡,轻轻混匀,酶标板加上盖,37℃反应120分钟。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。
3. 每孔加检测溶液A工作液 100ul,37℃,60分钟。洗板3次,350ul/每孔,甩干。
4. 每孔加检测溶液B工作液 100ul,37℃,60分钟,洗板5次,甩干。
5. 依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光显色30分钟(此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显)。
6. 依序每孔加终止溶液50ul,终止反应(此时兰色立转黄色)。用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
注:
1.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2NH2 SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
2.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内。
洗板方法:
手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
特异性:本试剂盒可同时检测改指标,且与其它相关蛋白无交叉反应。
小鼠钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)ELISA检测试剂盒
计算:
以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项:
1.洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
2.一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
3.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
4.如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数。
5.在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。
6.底物请避光保存。
检测范围:
请咨询在线客服或拨打客服热线。
说明
1.试剂盒保存:2-8℃
2.有效期:6个月
3.浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
5.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
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文献和实验(1.北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京100089;2.北京农学院动物科技系,北京102206; 3. 新疆农业大学动物医学学院,新疆乌鲁木齐830052) 摘 要:利用碳化二亚胺(EDC)法将氨苄青霉素(Ampicillin,AMP)与匙孔嘁血蓝蛋白(mcKLH)偶联制备免疫原免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术将免疫鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,建立分泌氨苄青霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。同上方法将氨苄青霉素连接到阳离子
几小时的孵育,且使用放射性同位素。其他传统方法包括2D凝胶电泳 ,这种技术假定磷酸化会改变蛋白的迁移率和等电点。 鉴于这些方法很费力,磷酸化依赖抗体的开发受到研究人员的极大欢迎。1981年,第一个有记录的磷酸化抗体在兔子中产生,使用的是钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)的苯甲酰磷酸结合物。这一抗体广泛地识别了包含磷酸酪氨酸的蛋白。十年后,利用合成的磷酸化肽段来免疫兔子,开发出多个磷酸化状态特异抗体,这些磷酸化肽段代表了目标蛋白磷酸化位点周围的氨基酸序列。之后将免疫血清上样到肽段亲和柱中,产生高度特异
;脂类和核酸必需和蛋白质及多糖形成复合物才具有良好的免疫原性。 – 半抗原:又称为不完全抗原,分子量较小。例如:某些短肽、多糖、类脂和药物等。 • 半抗原必需与载体结合,才能获得免疫原性。 载 体 • 通常是具有高度免疫原性的大分子物质,具有将免疫原性传递给耦联的半抗原能力。 – 常用的载体有钥孔血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)、牛血清白蛋白(bovine serum albumin, BSA)、卵白蛋白(Ovalbumin,OVA)等。 –
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