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- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
77
- 供应商：
深圳子科生物
- 检测范围：
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- 检测方法：
酶联免疫分析ELISA试剂盒
- 应用：
仅供科研研究实验
- 标记物：
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- 规格：
96孔
样品制备：
1、研磨样品，用20目筛过滤，不马上使用的样品要放在冰箱储存。
2、在烧杯中称量50g样品和5g NaCl。
3、并加入100ml 80%的甲醇水溶液，密封放置。
4、剧烈震荡1分钟。
5、用Whatman GF/A滤纸过滤至少10ml样品处理液，然后转移到一个新的干净的容器中。
6、用20ml的水稀释5ml的提取液。
7、用玻璃纤维滤纸过滤。
操作步骤：
注意：标准和样品做平行可以增加精密度和准确度
1.使用前将试剂盒和样品处理液提前从冰箱中拿出来使其达到室温。
2.从铝箔袋中拿出要求数量的微孔条，放入干燥剂并重新封好袋子以免微孔条受潮。
3.每个测试孔都加入50 μL酶结合物
4.在对应的微孔中加入50μL的标准和样品，确保吸头要干净。
5.每个测试孔都加入50 μL抗体溶液
6.孵育10分钟
7.孵育完成后，将微孔中的溶液倒入水槽中，用自来水加满微孔然后倒掉，重复四次，总共五次洗板。
8.最后一次洗板后要拍板，去掉残留的洗液。
9.每个测试孔加入100μL底物。
10.孵育10分钟
11.每个测试孔加入100μL终止液。
12.450nm 下读取每个孔的吸光度值（OD）。
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文献和实验物质的量有一个粗略的估计。国外检测HBsAg的ELISA试剂盒检测敏感度约为0.5ng/ml，阳性对照品中含量约为10ng/ml。在对照品中一般加入抗生素和防腐剂，以利保存。 ELISA相关仪器试剂设备 酶标仪 洗板机 化学发光检测仪 ELISA检测试剂盒 ELISPOT检测 ELISA试剂盒 抗体 酶标板
经1:5000稀释后，在与人IgG包被的固相作ELISA试验时，将发生阳性反应。但在用于具体的ELISA检测中，酶标抗体的最适工作浓度受到固相载体的性质、包被抗原或抗体的纯度以及整个检测系统如标本、反应温度和时间等的影响，因此必须在实际测定条件下进行"滴配"选择能达到高敏感度的最大稀释度作为试剂盒中的工作浓度。 （四）结合物的保存 酶标抗体中的酶和抗体均为生物活性物质，保存不当，极易失活。高浓度的结合物较为稳定，冰冻干燥后可在普通冰箱中保存一年左右，但冻干过程中引起活力的减低，而且使用时需经复溶，颇为
较难得到，国外试剂 盒中的对照品多以复钙人血浆(recalcified human plasma)为原料，即在血浆中加入钙离 子，使其中的纤维蛋白质凝固，除去凝块后所得的液体，其组成与血清相似。阴性对照品 须先行检测，确定其中不含待测物质。例如HBsAg检测的阴性对照品中不可含HBsAg，最 好抗HBs也是阴性。阳性对照品多以含蛋白保护剂的缓冲液为基质，其中加入一定量的待 检物质，此量最好在试剂说明书中标明。加入的量应与试剂的敏感度相称，在测定中得到 的吸光值与受检标本吸光
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