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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
77
- 供应商:
子科生物
- 检测范围:
详情咨询在线客服
- 检测方法:
酶联免疫分析ELISA方法
- 应用:
仅供科研研究课题
- 适应物种:
大鼠
- 标记物:
详情咨询在线客服
- 样本:
大鼠血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等
- 规格:
96T/48T
●规格: 96T/48T
●反应时间: 1-5h
●所需样本体积: 50-100ul
●检测波长: 450 nm
●用途: For research use only. Not for diagnostic use.
●特点:灵敏性高、特异性强、重复性好
●服务:子科生物所有的elisa试剂盒均可免费代测,全程Elisa实验技术指导。
深圳子科生物ELISA试剂盒优质供应商,拥有10年的研发和生产经验,拥有先进的仪器设备,专业的技术人员和实验技术,目前已经建立强大的实验技术服务平台,品牌设立为:ZIKER 。产品详细报价可以咨询我们公司客服人员,咨询电话:QQ: 2811391951
预期应用:ELISA法定量测定相关血清、血浆或其它相关液体中的含量/活性。
标本的采集及保存:
1.血清:标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
操作步骤
各试剂在使用前平衡至室温。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。除空白孔外,余孔分别加标准溶液或待测样品100ul,注意不要有气泡,轻轻混匀,酶标板加上盖,37℃反应120分钟。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。
3. 每孔加检测溶液A工作液 100ul,37℃,60分钟。洗板3次,350ul/每孔,甩干。
4. 每孔加检测溶液B工作液 100ul,37℃,60分钟,洗板5次,甩干。
5. 依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光显色30分钟(此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显)。
6. 依序每孔加终止溶液50ul,终止反应(此时兰色立转黄色)。用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
注:
1.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2NH2 SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
2.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内。
洗板方法:
手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
特异性:本试剂盒可同时检测改指标,且与其它相关蛋白无交叉反应。
计算:
以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项:
1.洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
2.一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
3.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
4.如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数。
5.在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。
6.底物请避光保存。
检测范围:
请咨询在线客服或拨打客服热线。
说明
1.试剂盒保存:2-8℃
2.有效期:6个月
3.浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
5.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
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文献和实验蛋白对检测的干扰,血清中有大约 55% 的蛋白为白蛋白,而 IgG 大约占血清中蛋白总量的 10-25%,这些高丰度蛋白的存在会增加低丰度蛋白检测的难度,去除占血清总蛋白近 75% 的白蛋白和 IgG 将有助于更好地鉴定其他的蛋白。G-Biosciences 的锚点™白蛋白去除试剂盒堪称白蛋白去除神器。血浆和脑脊髓液等样本中,包含大量的白蛋白,从而封闭掉在二维凝胶电泳中发现和鉴定其他低丰度蛋白的可能。AlbuminOUT™白蛋白去除试剂盒被设计用来在这种样本中大量去除白蛋白。 这种白蛋白
聚集成 CpG 岛(CCIs),50% 以上的基因启动子都含 CCIs,一般都集中在转录起始位点。甲基的存在导致了转录过程终止,从而使这些基因沉默。其机制主要与转录因子 CTCF(CCCTC binding factor)蛋白和甲基 CpG 结合蛋白(MBP)有关。CTCF 可以控制染色质三维结构的改变,促进或抑制不同位点的基因表达,但 CTCF 不能与甲基化CpG 结合,MBP 含有甲基化 CpGs 结合域,同时能与组蛋白去乙酰化酶(HDAC)结合,可重构染色质并抑制转录。 图
在临床检验中一般采用商品试剂盒进行测定。前文(2.2)已述,ELISA中有三个必要的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物等。完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);(3)酶的底物;(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);(5)酶联物(结合物)及标本的稀释液;(6)洗涤液;(7)酶反应终止液。一、免疫吸附剂已包被抗原或抗体的固相载体在低温(2~8℃)干燥的条件下一般可保存6个月
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