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- 文献和实验
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—20℃,12个月
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100
- 供应商:
上海远慕生物
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1000T
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文献和实验培养(12-16h),按1:100 比例将过夜培养的菌液(500ul)加入到新鲜的50 ml LB培养液中,于37 ℃振荡培养至OD600约为0.4(培养时间2h40~50min)。冰浴30分钟后4度1000g离心10min,弃上清,收获细菌。加入原体积十分之 一(这里为5 ml)的1× TSS 液(冰预冷)悬浮细胞,然后分装成100 ul/份,全部冰上操作,-80度保存。 三、 转化时取一管(100 ul)感受态细菌,(冻存细胞应 置于冰上缓慢融化后立即使用)加入3-5ul DNA
相关专题 DNA连接与转化 大肠杆菌的基因工程 SS方法制备感受态细菌 (又称一步法) 一、 准备工作 1、 缓冲液1×TSS的配制: 事先配制1M的氯化镁——20.3g氯化镁(6分子 水结晶)/定容于100ml去离子水 后封装,不用灭菌。 取干净的100ml 量筒和100ml 烧杯,用量筒量取100ml去离子水,加入至烧杯中,取 1 g 蛋白胨,0.5g 酵母抽提物,0.5g 氯
碧云天生产的超级感受态细菌制备试剂盒(Supercompetent Cell Preparation Kit)是一种用于快速制备高转化效率大肠杆菌 感受态细菌的试剂盒。超级感受态细菌制备试剂盒是在传统超级感受态细菌制备方法的基础上进行适当改良而成,操作便捷,转化效率高。使用本试剂盒可以使感受态效率达到108-109 cfu/μg质粒。对于小的质粒效率略高,而对于大的质粒则效率略低一些。用本试 剂盒制备的超级感受态细菌不仅可以转化质粒,而且非常适合于转化普通的连接产物,特别适合于转化平端
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