12孔TC处理聚苯乙烯细胞小室培养板，含盖，无菌，1块/包，

各类细胞培养小结

2d的Wistar大鼠10只（第三军医大学大坪医院野战外科研究所动物中心提供），无菌条件下取出双侧视神经。接种至24孔培养板内经多聚赖氨酸处理的盖玻片上。而后加入含30g·L-1小牛血清的DMEM/F12培养基，37(C，50mL·L-1 CO2，100%湿度连续培养3d。3d后弃废液，改为含5g·L-1小牛血清DMEM/F12条件培养液继续培养。每周换液2次。在获得足够的细胞数量后，改用无血清条件培养液继续培养，每2d换液一次。 1.3 形态学观察 每天在倒置显微镜（日本Olympus），观察

杂交瘤技术基本程序与方法

、50ml、25ml细胞培养瓶，10ml、1ml刻度吸管，试管，滴管（弯头、直头），平皿，烧杯，500ml、250ml、100ml盐水瓶，青霉素小瓶，10ml、5ml、1ml注射器等，96孔、24孔细胞培养板，融合管（50ml圆底带盖玻璃或塑料离心管），眼科剪刀，眼科镊，血细胞计数板，可调微量加样器（~50ul，~200ul，~1000ul），弯头针头，200目筛网，小鼠固定装置等。此外，杂交瘤细胞的筛选与检测的仪器设备，依据检测单抗的方法不同而各异，请参阅本节有关部分。淋巴细胞杂交瘤技术的主要步骤

【分享】ELISA原理

数抗原抗体结合的合适温度。在建立ELISA方法作反应动力学研究时，实验表明，两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2小时，产物的生成可达顶峰。为加速反应，可提高反应的温度，有些试验在43℃进行，但不宜采用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为彻底，在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过夜，以形成最多的沉淀。但因所需时间太长，在ELISA中一般不予采用。保温的方式除有的ELISA仪器附有特制的电热块外，一般均采用水浴，可将ELISA板置于水浴箱中，ELISA板底应贴着水面，使温度迅速平衡。为避免蒸发，板上应加盖