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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8℃
- 保质期:
1年
- 英文名:
Gram Staining Kit
- 库存:
20
- 供应商:
青岛海博生物
- CAS号:
/
- 规格:
5ml*8
试剂盒组成:
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组成 |
别名 |
规格 |
配制依据 |
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溶液A |
结晶紫染色液 |
5ml*2 |
将1.0g结晶紫完全溶解于20ml 95%乙醇, 然后与80ml 1%草酸铵水解液混合。 |
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溶液B |
碘液 |
5ml*2 |
将1.0g碘与2.0g碘化钾混合,然后加少许 蒸馏水充分振摇,待完全溶解,再加蒸馏水至300ml。 |
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溶液C |
95%乙醇 |
5ml*2 |
/ |
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溶液D |
沙黄复染液 |
5ml*2 |
将0.25g沙黄溶解于10ml95%乙醇中,然后 加90ml蒸馏水稀释。 |
检验原理:
通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或丙/酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此,能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色;而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色。
产品用法:
1.涂片经火焰固定,加(结晶紫溶液)溶液A染1分钟,用清水冲去染液。
2.加(碘液)溶液B染1分钟,水洗。
3.加(95%乙醇)溶液C,不时摇动玻片约10-30秒,至无紫色脱落为止,水洗。
4.加(沙黄复染液)溶液D,染1分钟,水洗。
5.干后油镜镜检。阳性菌呈紫色、阴性菌呈淡红色。
革兰氏染色液试剂盒微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置/℃/培养/小时。






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文献和实验。 过氧化氢酶试验:滴加3% 过氧化氢试液,若菌落表面有气泡产生,为过氧化氢酶试验阳性,否则为阴性。本菌为阴性反应。 3、需购买试剂: 菌株 培养基及试剂 金黄色葡萄球菌 HB8278革兰氏染色液试剂盒、HB4117 兔血浆、HB0109-7营养琼脂培养基 大肠埃希氏菌 HBIG13 HBI大肠杆菌生化鉴定条、HB8280
:高脂实验样本该如何处理? A1:高脂实验样本含有脂肪,不是均质溶液,若直接上样,会影响抗原抗体的结合,导致测值不准确。建议先大转速(5000×g)离心,静置 10min 后,取中层较澄清液体,再用大转速(≥5000×g)离心一次,取中下层清液,用于检测。 Q2:实验样本稀释方案是怎样的? A2:试剂盒检测范围不等同于实验样本中待测物的浓度范围。实验前,建议通过相关文献预估实验样本中待测物的浓度,并通过预实验确定实验样本的实际浓度情况。 如果您的检测样本需要稀释,参考稀释方案如下: 稀释 100
细胞来说要少很多。 最后,针对细胞上清液的外泌体的提取。这个是老生常谈的问题,这里就不再多讲了。如果实验室有超速离心机的话,那就使用超速离心的方法,按照前文建议的预处理操作后,超离后的沉淀也会增加的,同时外泌体的质量也会提升。如果实验室没有超离的情况下,也可以通过试剂盒的方法来提取,除了进口品牌外,也可以使用一些国产试剂盒,质量也不亚于进口品牌的。 总结一下,为了获得高质量的外泌体:需要在细胞培养时减少正常血清的使用,推荐去外泌体血清或者外泌体专用无血清培养基;收获
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