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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
见说明书
- 亚型:
见说明书
- 形态:
液态/粉末
- 保存条件:
-20oC
- 克隆性:
多克隆
- 标记物:
未标记
- 适应物种:
见说明书
- 宿主:
Rabbit,兔
- 应用范围:
WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- 浓度:
200ug/ml
- 靶点:
见说明书
- 抗体英文名:
Polyclonal Antibody to Ectodysplasin A (EDA)
- 抗体名:
外异蛋白A(EDA)多克隆抗体
| Organism species | Mus musculus (Mouse) |
| Product No. | XYC452Mu01 |
| Clonality | Polyclonal |
| Host | Rabbit |
| Immunoglobulin Type | IgG |
| Purification | Affinity Chromatography |
| Applications | WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA |
| Concentration | 200ug/ml |
| UOM | 100ug |
| Conjugate | No Conjugate |
Immunocytochemistry in formalin fixed cells: 1:50-500
Immunohistochemistry in formalin fixed frozen section: 1:50-500
Immunohistochemistry in paraffin section: 1:10-100
Enzyme-linked Immunosorbent Assay: 1:100-1:5000
Optimal working dilutions must be determined by end user.
containing 0.02% NaN3, 50% glycerol.
Usage: 10uL per well when 3,3'-Diaminobenzidine(DAB) as the substrate.
5uL per well when used in enhanced chemilumescent (ECL).
Note: The quality control is specifically manufactured as the positive control. Not used for other purposes.
Loading Buffer: 100mM Tris(pH8.8), 2% SDS, 200mM NaCl, 50% glycerol, BPB 0.01%, NaN3 0.02%.
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文献和实验一、免疫亲和层析程序方案概述 1. 将抗体与基质(微珠)共价交联并制备抗体亲和层析柱。 先将单克隆抗体或经过亲和层析纯化的多克隆抗体以共价方式交联到固相基质(微珠)上。除特殊情况外,一般不使用未经纯化的多抗,因为从多抗层析柱上洗脱抗原非常困难,通常需要以适当的条件先使抗原变性。抗体以共价方式交联到固相基质上有很多不同的方案,将抗体交联到蛋白A或蛋白G微珠上可能最简单。另一种方法是将抗体共价交联到具有活性基团的微珠上。 2. 将抗原结合到抗体-微珠基质上。 在抗体-微珠基质
IgM亚型的单抗。 不过需要注意的是Protein L填料的成本也非常昂贵。 除了上述介绍的纯化方法外,单抗还可以用抗原亲和纯化,其具体原理和操作和多抗的纯化完全一样,有兴趣的可以参见本站多克隆抗体纯化一节,这里不再废话。 5. 杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化 在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。采用灵敏、快速、特异的免疫学方法,筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交
A珠子 8. (Bradford 法)做蛋白标准曲线,测定蛋白浓度,测前将总蛋白至少稀释1:10倍以上,以减少细胞裂解液中去垢剂的影响(定量,分装后,可以在-20℃保存一个月) 9. 用PBS将总蛋白稀释到约1 μg/μl,以降低裂解液中去垢剂的浓度,如果兴趣蛋白在细胞中含量较低,则总蛋白浓度应该稍高(如10 μg/μl) 10. 加入一定体积的兔抗到500μl总蛋白中,抗体的稀释比例因兴趣蛋白在不同细胞系中的多少而异 11. 4℃缓慢摇动抗原抗体混合物过夜或室温2h,激酶或磷酸酯酶活性分析建议
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