兔抗AFP血清

兔抗AFP血清

阴阳性对照正常，但质控、参考品或个别弱阳性标本未能检出
1.未达要求的孵育温度及孵育时间 可检出强阳性标本，但 质控或弱阳性标本受 温度变化影响较大而被未检出
2.质控品或标本高温放置过久，或被反复冻融致待测物滴度下降，而未能检出
3.仪器设定不正确，滤光片不匹配

对策
1.确认孵育的温度及孵育时间达到要求
2.质控品或标本避免反复冻融。标本在一周内使用的，可存于 2-8℃，如需长期保存，应置于-20℃以下保存。质控品应小量分装，并置于-20℃以下保存
3.重新设定酶标仪的参数，特别是检查滤光片是否匹配

终止后，目测结果正常，但酶标仪读值结果偏低
1.酶标仪参数设定不正确
对策
1.重新设定酶标仪的参数，特别是检查滤光片是否匹配


目测结果正常，但酶标仪读值结果偏低?
灵敏度过高、板底高、高背
景
兔抗AFP血清​
终止后，整板结果显现均一的黄色或淡黄色；或阴阳性对照、质控正常，标本阴性标本 OD值过高
1.整板的黄板现象可能是由于错加其他试剂造成，如同时操作两对半 试剂时，测 HbsAb板用于测HBsAg等
2.酶标对吸头的污染以及对盛放显色剂容器的污染都易造成黄板现象
3.显色剂在光照条件下放置过久，实验前已变蓝
4.孵育温度过高或孵育时间过长
5.未按要求洗板。特别是洗涤时每孔未注满洗液，易造成花板黄板现象
6.花板，一般是由于临床标本的收集、处理和保存方法不当造成

对策
1.实验前检查试剂的组分及批号，确认所有组分均属于对应的试剂盒。不同试剂盒或不同批号的试剂不能混用
2.避免试剂组分间的交叉污染，确保吸头、容器的干净
3.显色剂 A、B未使用前避光保存
4.孵育温度应控制在 37-38℃，孵育时间严格按照说明书操作。
5.严格按说明书要求洗板
6.放置时间（自然放置 1~2h）及离心转速（3000r/min）、离心时间（15min）应引起注意

出现随机 性的花板、跳孔现象

1.样品离心不完全，反应孔内发生凝血或残留细胞成分
2.加样时交叉污染
3.手工洗板造成的交叉污染
4.洗板机加液头堵塞导致加液不满或吸液残留量较大，造成 花板、跳孔
5.拍板时交叉污染

对策
1.充分离心， 3000rpm6分钟以上
2.加标本时尽量 避免交叉污染。如盛标本的试管周围常有血痂，易脱落，应远离酶标板
3.手工洗板时前 3次注洗液后应立即弃去，后几次再设定浸泡时间，可减少交叉污染
4.疏通加液头，使洗板时每孔均注满洗液，吸液时残留量要小
5.洗板完毕拍板时用合适的吸水纸巾，不要把无关物质拍进板孔，并尽量不要在同位置拍，以免交叉污染

假阳性

假阳性现象是一个现象，可参考上文 “灵敏度过高、板底高、高背景” 中的分析。这里只列举常见的原因及对策
1.计算 Cutoff值时使用的公式不正确，导致计算得出的CutOff值过低，从而导致出现假阳性
2.洗板时未能注满洗液或洗板次数、浸泡时间不够， 洗涤不充分，样 品中有其他成分残留 导致花板、跳孔，假阳性增多
3.血清标本处理不当，如未除去细胞成分、纤维蛋白原及其它干扰物可出现孔底由变蓝的跳孔现象，此标本重复实验结果往往是阴性
4.厂家试剂质量的变化造成
5.水质问题
6.加酶量过多（如 50uL误认为100uL）或丙肝酶稀释时加量过多
7.培养箱温度超过 37℃或酶结合物反应时间或底物显色时间超过
8.底物配制时间过长、或底物污染
9.该批样品放置时间过长，样品污染
10.移液嘴重复使用，未洗净或消毒不完全而用于加酶或底物
兔抗AFP血清​
对策
1.CutOff值计算公式应严格参照所属产品的说明书，应注意各个酶免产品的Cutoff值计算公式不尽相同
2.严格按说明书要求洗板。调整洗板机时，应注意有时仪器标示的液量与实际液量并不相符，应根据实际情况调整至每孔注满
3.放置时间（自然放置 1~2h）及离心转速（3000r/min）、离心时间（15min）应引起注意
4.国家标准要求提高灵敏度时，厂家试剂灵敏度也相应提高，假阳率常常有所上升，但只要在合理范围，是可以接受的
5.防止蒸馏水污染
6.加酶前检查移液器调节量是否准确，稀释酶时思想要集中。
7.放入板以前要检查培养箱的温度，准确定时
8.底物应在酶反应完毕即将洗涤前 5分钟配制，注意避光
9.样品应保持新鲜，或低温保存，防止污染
10.移液嘴尽可能一次性使用

重复性差
1.样品数量不一，加样时间长短不一
2.样品加入后未混匀
3.酶标仪滤光片不对或输入波长不对
4.酶标仪测定重复性差
5.洗涤不正确
6.温育条件不一致（一次用水育，一次用恒温箱）
7.慎多加或少加酶或显色剂
8.阈值附近时阴时阳
9.加样量不足、保温时间、洗涤条件一致

对策
1.重复某一样品时，加样时间尽可能与第一次接近
2.加样后在混匀器上充分混匀
3.TMB显色用450/630波长
4.校对酶标仪
5.洗涤液注满各孔但不要溢出。洗板时反应板面向下，垂直用力甩净内容物（可多甩几次），在干净、无或少尘的吸水材料上拍干。洗板机洗板时不应有堵孔，洗涤应充分
6.恒温箱温育较水浴显色深，?OD值高出0.1-0.15,最好均采用恒温箱.如用水浴水温应控制在37℃
7.多加时显色深，少加则浅，用记号笔圈上，便于分析
8.同一样品做三个复孔，以二个（含二个以上相同结果为准）
9.尽可能使用同一移液器和装紧吸嘴重复测定标本。条件、人员等应尽量与上次保持一致
兔抗AFP血清

相关产品：

鸡免疫球蛋白G Fc段低亲和力受体IIIb(FcγR3B)酶联免疫试剂盒	Chicken FcγR3B (Fc Fragment of IgG Low Affinity IIIb Receptor) ELISA Kit
鸡趋化素样因子超家族成员8(CKLFSF8)酶联免疫试剂盒	Chicken CKLFSF8 (Chemokine Like Factor Superfamily 8) ELISA Kit
鸡血红蛋白H(HbH)酶联免疫试剂盒	Chicken HbH (Hemoglobin H) ELISA Kit
鸡去唾液酸糖蛋白受体2(ASGR2)酶联免疫试剂盒	Chicken ASGR2 (Asialoglycoprotein Receptor 2) ELISA Kit
鸡鸟苷酸环化酶激活因子2A(GUCA2A)酶联免疫试剂盒	Chicken GUCA2A (Guanylate Cyclase Activator 2A) ELISA Kit
鸡血小板反应蛋白4(TSP-4)酶联免疫试剂盒	Chicken TSP-4 (Thrombospondin-4) ELISA Kit
鸡半胱氨酰白三烯受体1(CYSLTR1)酶联免疫试剂盒	Chicken CYSLTR1 (Cysteinyl Leukotriene Receptor 1) ELISA Kit
鸡游离血红蛋白(f-Hb)酶联免疫试剂盒	Chicken f-Hb (Free Haemoglobin) ELISA Kit
鸡原钙黏素β16(PCDHβ16)酶联免疫试剂盒	Chicken PCDHβ16 (Protocadherin Beta 16) ELISA Kit
鸡肌球蛋白轻链激酶(MLCK/MYLK)酶联免疫试剂盒	Chicken MLCK/MYLK (Myosin Light Chain Kinase) ELISA Kit
鸡IV D组磷脂酶A2(PLA2G4D)酶联免疫试剂盒	Chicken PLA2G4D (Phospholipase A2, Group IV D) ELISA Kit
鸡细胞周期素D2(CCND2)酶联免疫试剂盒	Chicken CCND2 (Cyclin-D2) ELISA Kit
鸡异常凝血酶原(APT)酶联免疫试剂盒	Chicken APT (Abnormal Prothrombin) ELISA Kit
鸡血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)酶联免疫试剂盒	Chicken PDGF-BB (Platelet Derived Growth Factor-BB) ELISA Kit
鸡G蛋白偶联雌激素受体1(GPER1)酶联免疫试剂盒	Chicken GPER1 (G Protein Coupled Estrogen Receptor 1) ELISA Kit
鸡血小板衍生生长因子D(FDGFD)酶联免疫试剂盒	Chicken PDGFD (Platelet Derived Growth Factor D) ELISA Kit
鸡脂联素(ADP/Acrp30)酶联免疫试剂盒	Chicken ADP/Acrp30 (Adiponectin) ELISA Kit

​


​