2. 溶液 I 对人体有刺激性,操作时请小心,并注意适当防护。
该产品被引用文献(仅展示部分):
Wang Y; Cheng Z; Xu J, et al., Fat mass and obesity-associated protein (FTO) mediates signal transducer and activator of transcription 3 (STAT3)-drived resistance of breast cancer to doxorubicin. Bioengineered 2021, 12 (1), 1874-1889.
PubMed: 34076564
操作流程:
1. 加入3倍体积的溶液 I,混匀。例如:如果DNA样品体积为100μl,则加300μl 溶液 I。如果混合后体积较大,可以把部分样品加入到纯化柱内,经离心处理后,再加入剩余的样品继续处理。矿物油对于本试剂盒没有干扰。
2. 加入到DNA纯化柱内,室温放置2min。
3. 12,000rpm离心1min,倒弃收集管内的液体。
4. 在DNA纯化柱内加入600μl 溶液Ⅱ。
5. 12,000rpm离心1min,洗去杂质。倒弃收集管内的液体。
6. 再加入600μl 溶液Ⅱ,12,000rpm离心1min,进一步洗去杂质。倒弃收集管内的液体。
7. 12,000rpm离心2min,除去残留液体并让残留的乙醇充分挥发。
8. 将DNA纯化柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加适量的溶液Ⅲ(如果回收的目的片段>4 kb,则溶液Ⅲ应置于65-70℃水浴预热),室温放置2min。12,000rpm离心2min收集DNA溶液。注意:溶液Ⅲ的体积不应少于30 μl,体积过少会影响回收的效率。溶液Ⅲ的pH值对于洗脱效率有较大影响。若后续做测序,需使用ddH2O做洗脱液,并保证其pH值在7.0-8.5范围内,且DNA产物应保存在-20℃,以防DNA降解。为了提高DNA的回收量,可将离心得到的溶液重新加回离心吸附柱中,室温放置2min,12,000rpm离心2min,将DNA溶液收集到离心管中。