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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
见说明书
- 亚型:
见说明书
- 形态:
液态/粉末
- 保存条件:
-20oC
- 克隆性:
多克隆
- 标记物:
未标记
- 适应物种:
见说明书
- 宿主:
Rabbit,兔
- 应用范围:
WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- 浓度:
200ug/ml
- 靶点:
见说明书
- 抗体英文名:
Polyclonal Antibody to Aggrecan (AGC)
- 抗体名:
聚集蛋白聚糖(AGC)多克隆抗体
| Organism species | Homo sapiens (Human) |
| Product No. | XYB908Hu01 |
| Clonality | Polyclonal |
| Host | Rabbit |
| Immunoglobulin Type | IgG |
| Purification | Affinity Chromatography |
| Applications | WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA |
| Concentration | 200ug/ml |
| UOM | 100ug |
| Conjugate | No Conjugate |
Immunocytochemistry in formalin fixed cells: 1:50-500
Immunohistochemistry in formalin fixed frozen section: 1:50-500
Immunohistochemistry in paraffin section: 1:10-100
Enzyme-linked Immunosorbent Assay: 1:100-1:5000
Optimal working dilutions must be determined by end user.
containing 0.02% NaN3, 50% glycerol.
Usage: 10uL per well when 3,3'-Diaminobenzidine(DAB) as the substrate.
5uL per well when used in enhanced chemilumescent (ECL).
Note: The quality control is specifically manufactured as the positive control. Not used for other purposes.
Loading Buffer: 100mM Tris(pH8.8), 2% SDS, 200mM NaCl, 50% glycerol, BPB 0.01%, NaN3 0.02%.
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文献和实验的机理如下: 连接反应进行的条件: (1)Buffer体系。上述两个连接反应都应该在碱性环境下进行。pH宜在8-10之间,推荐使用Na2CO3-NaHCO3体系,pH尽量偏离蛋白的等电点,但不可高于10,否则填料很容易水解。pH也不能过低,否则抗原的氨基或巯基会被质子化,无法与beads结合。也可以考虑用其它的缓冲体系,但是绝对不可引入带有游离氨基或者巯基的化合物。为了防止蛋白类抗原的聚集,体系中还可以加入0.5M NaCl以提高盐离子浓度。 (2)蛋白质浓度
蛋白质的聚集。在蛋白质解冻过程中出现的聚集可通过37°C预热而溶解。加入固体叠氮化钠至浓度为0.05%,4°C,15,000xg离心5分钟,移出澄清的抗血清再经过滤器 过滤除去多余的脂。 ⒊ 亲和层析 将抗体用TBS缓冲溶液以1:5的比例进行稀释,再用过滤器进行过滤。以每分钟0.5 ml的速度将抗血清上到柱上,为保证抗血清与填料的结合,需连续上柱2次并保留上样流出液。用TBS缓冲溶液清洗柱子至Aλ280nm 在柱中加入10ml,pH1.9洗脱缓冲
5ml或10 ml蛋白A sepharose CL-4B填料,在真空瓶中将等体积的填料和TBS缓冲溶液混合,搅拌。抽真空约15分钟以除去填料中的气泡,否侧在柱中形成的气泡影响柱子的容量和分离效果。将蛋白A sepharose CL-4B填料缓慢加入玻璃柱中,利用泵控制填充速度为1 ml/分-2 ml/分,避免柱干,利用10倍于床体积并经过预冷的TBS缓冲溶液平衡柱子。 ⒉ 制备抗血清 将抗血清放入冰水或4°C冰箱中缓慢解冻以避免蛋白质的聚集。在蛋白质解冻过程中出现的聚集可通过37°C预热
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