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- 详细信息
- 询价记录
- 技术资料
- 库存:
大量
- 供应商:
HZbscience
- 肿瘤类型:
肥大细胞白血病
- 细胞类型:
复苏或冻存
- 品系:
细胞系
- 组织来源:
癌细胞系
- 相关疾病:
肥大细胞白血病
- 物种来源:
人、大鼠、小鼠、、、、
- 免疫类型:
请咨询销售人员
- 细胞形态:
淋巴细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
肥大细胞白血病
- 器官来源:
人
- 运输方式:
干冰运输或活细胞运输
- 年限:
永久
- 生长状态:
悬浮生长
HMC-1 人肥大细胞
一、细胞基本属性
细胞名称
HMC-1 人肥大细胞
细胞别称
HMC-1
种属来源
人
生长特性
悬浮生长
细胞形态
淋巴母细胞样
简介
来源于一名 52 岁男性肥大细胞白血病患者的外周血样本。该细胞有多重亚型分别
为:HMC-1 5C6,HMC-1.1 ,HMC-1.2 。广泛用于人肥大细胞功能研究,因为它们
表现出组织肥大细胞的许多关键特征,例如组胺、类胰蛋白酶、肝素和类似细胞表
面抗原谱的表达 (1,2)。受体酪氨酸激酶 KIT 在肥大细胞上表达,在肥大细胞
的增殖、功能和存活中起重要作用。KIT 中的激活突变与肥大细胞生长失调有关,
并与肥大细胞肿瘤和系统性肥大细胞增多症有关。据报道,HMC-1 细胞系中存在两
个 KIT 激活点突变 。这两种突变都将受体转化为组成型酪氨酸磷酸化和活性状态
,导致生长因子非依赖性增殖。HMC-1.1 (HMC-1(560)) 和 HMC-1.2 (HMC-1
(560,816))是HMC-1 细胞系的两个变异亚系。HMC-1.1 具有 V560G 突变,但不
具有 D816V 突变。HMC-1.2 同时具有 V560G 和D816V 突变,并且表现出比 HMC-
1.1 更高的增殖率。有人认为,HMC-1.2 的较高增殖潜力可能归因于 D816V 突变
。
生物安全等级
1
细胞规格
1×10 6cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测
无
培养基
准备 IMDM培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。
培养条件
气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件
无血清冻存液,液氮储存
细胞接收后的处
理
1)收到细胞后,75%酒精消毒15ml离心管,若发现有破损、有液溢出及
细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)离心管直接在1000RPM条件下离心5min,弃去上清液,完全培养基
重悬细胞后,根据离心后的沉淀量进行传代,转移至T25培养瓶中后,请
在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×
)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的
依据。
3)悬浮细胞:传代时使用【半换液法】对细胞状态有利,因此我库建议
您使用【半换液法】进行传代,刚收到细胞时建议1:2传代较为合适。将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含8mL完全培
养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。
然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下
观察细胞生长情况和细胞密度。
如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞传代可以参考以下方法:
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法【半换液法】:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般
情况下细胞密度维持在1×10 5~1×10 6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正
常生长。
【离心换液法】:
如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培
养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配
置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
1)
收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面
T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,
来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10 6~1×10 7个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心5min,去掉上清。用无血清细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×
10 6~1×10 7个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、
日期等信息。
将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同
时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
三.细胞出现问题,予以重发情况:
1. 细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发;
2. 细胞污染问题,请在收到产品3 天内,给我们提出真实的实验结果,核实后重发;
3. 常温发货的细胞静置2小时后,干冰冻存发货的细胞复苏后2 天后,绝大多数细胞未存活,(需提
供真实清晰的细胞状态照片),重发;
4. 干冰冻存发货的细胞复苏后2天后或常温发货的细胞静置2 小时候并且未开封,出现污染,重发;
5. 细胞活性问题,请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,
和每天的细胞照片,核实后予重发;
6. 细胞收到当天以及第2,3 天请拍照,3 天未告知的,视为产品合格。4-7 天内出现问题需提供收到
细胞前3天照片和细胞出现问题的照片以及细胞相关操作的详细步骤,并跟技术人员沟通的,由技术
人员判定为我方责任的,重发。
四、细胞出现问题,不予以重发的情况:
1. 客户操作造成细胞污染,不重发;
2. 客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发;3. 非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
4. 细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前3 天的细胞状态照片,不重发;
5. 细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发;
6. 收到细胞并发现问题与客服人员沟通的时间证明大于7 天的,不重发;
7. 视具体情况而定
注意事项:
1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,
所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液
氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹
掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。
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人肥大细胞,HMC-1细胞
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