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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 英文名:
Recombinant Nucleoside Phosphorylase (NP)
- 库存:
1000
- 供应商:
上海信裕
| Organism species | Mus musculus (Mouse) |
| Product No. | RPC683Mu01 |
| Source | Prokaryotic expression |
| Host | E.coli |
| Purity | > 95% |
| UOM | 50ug |
| Predicted Molecular Mass | 35.7kDa |
| Concentration | n/a |
| Applications | SDS-PAGE; WB; ELISA; IP. |
| Endotoxin Level | <1.0EU per 1µg (determined by the LAL method) |
| Residues | Met1~Asp286 with two N-terminal Tags, His-tag and T7-tag |
| Formulation | Supplied as lyophilized form in 20mM Tris, 150mM NaCl, pH8.0, containing 1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% sarcosyl, 5% trehalose, and preservative. |
MENEFTYEDY ETTAKWLLQH TEYRPQVAVI CGSGLGGLTA HLKEAQIFDY NEIPNFPQST VQGHAGRLVF GLLNGRCCVM MQGRFHMYEG YSLSKVTFPV RVFHLLGVET LVVTNAAGGL NPNFEVGDIM LIRDHINLPG FCGQNPLRGP NDERFGVRFP AMSDAYDRDM RQKAFSAWKQ MGEQRKLQEG TYVMLAGPNF ETVAESRLLK MLGADAVGMS TVPEVIVARH CGLRVFGFSL ITNKVVMDYE NLEKANHMEV LDAGKAAAQT LERFVSILME SIPLPD
Stability Test: The thermal stability is described by the loss rate of the target protein. The loss rate was determined by accelerated thermal degradation test, that is, incubate the protein at 37oC for 48h, and no obvious degradation and precipitation were observed. (Referring from China Biological Products Standard, which was calculated by the Arrhenius equation.) The loss of this protein is less than 5% within the expiration date under appropriate storage condition.
Protein bands: 10kDa, 14kDa, 18kDa, 22kDa, 26kDa, 33kDa, 44kDa and 70kDa.
Double intensity bands: The 26kDa, 18kDa, 10kDa bands are at double intensity to make location and size approximation of proteins of interest quick and easy.
Ready-to-use: No need to heat, dilute or add reducing agents before use.
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文献和实验体 对于包涵体的纯化,包涵体的前处理是很重要的。 包涵体中主要含有重组蛋白,但也含有一些细菌成分,如一些外膜蛋白、质粒DNA和其它杂质。洗涤常用1%以下的中性去垢剂,如Tween、Triton、Lubel和 NP40等加EDTA和还原剂2-巯基苏糖醇(DTT)、β-巯基乙醇等反复多次进行,因去垢剂洗涤能力随溶液离子强度升高而加强,在洗涤包涵体时可加50 mM NaCL。这样提取的包涵体纯度至少可达50%以上,而且可保持元结构。也可用低浓度的盐酸胍或尿素/中性去垢剂/EDTA/还原剂等洗去
-prone PCR) 和错掺突变,然后进行基因混编,这种方法只能在有限的序列上产生突变,并且需要花费很大精力去筛选 这些突变体。另外,通过 DNA 酶 I 处理的相关家族基因片段,然后进行混编(家族混编),发现主要产物是野生型的序列。为了避免上述情况,通过方法上的改进,我们发明了一种技术,可以使基因重组发生在序列相似性不高和 GC 含量差别很大的片段上,且可以显著减少未发生重组的基因产量。更进一步,可以控制引物延伸的条件,从而使子代基因与亲代基因不同,我们将这种方法称为简并寡核苷酸基因混编
重组蛋白纯化基本原则蛋白的分离纯化是生物工程下游阶段一个比较重要的部分,尤其在基因工程重组蛋白的分离纯化中,上游过程的许多因素会直接影响到下游蛋白的分离,充分利用上游对下游的影响,对蛋白的纯化做一个全面的考虑和整体的设计。是否带有亲和标签,His标签,GST标签等,不同的亲和标签选择不同的纯化方案;可能是可溶性表达,可能形成包涵体,可溶性的蛋白往往需要复杂的纯化步骤,而包涵体易于分离,纯度较高,但回收具有生物活性的蛋白却变的相当困难,需要对聚集的蛋白进行变复性,通常活性蛋白的得率比较低;是否
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