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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
请置于阴凉干燥处保存
- 保质期:
1年
- 英文名:
FB1 Broth
- 库存:
100
- 供应商:
青岛海博生物
- 规格:
10袋/盒
用途:用于李氏菌前增菌培养(SN 标准)
检验原理:酪蛋白酶消化物、动物组织酶消化物、牛肉膏粉、酵母膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和生长因子;氯化钠可维持均衡的渗透压;磷酸氢二钠和磷酸二氢钾为缓冲剂;七叶苷是可发酵的糖;氯化锂和其它的抗生素能抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌。
含225ml FB1增菌液均质袋微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置30±1℃需氧培养25±1小时。
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文献和实验菌种接种于 500 mL LB 培养液 (含用于筛选的抗生素) 中,37 ℃ 以 225 rpm 速度振荡培养 12~16 小时;2. 10,000 rpm,4 ℃ 离心 15 min 收集菌体;3. 将细菌悬浮于 100 mL 预冷的 STE(0.1M NaCl,10 mM Tris.Cl,pH8.0,1 mM EDTA,pH8.0)中,12,000rpm 离心收集菌体;4. 将菌体悬于 10 mL 细菌悬浮液中,再移至 50 mL 离心管中;5. 加入 1 mL 用 10 mM Tris.Cl (pH
刺激的细胞,直接将刺激后的细胞悬浮在细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS)中,然后进行第2步。 1.2 加满细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS), 300g离心细胞悬液5分钟,弃掉上清。 红细胞裂解 2.1 如需裂解红细胞(如脾脏),将10x红细胞裂解液(ACK buffer)用去离子水稀释到1x,放置到室温。将细胞重悬于3mL的1x ACK buffer中,室温孵育2-3分钟;如不需要裂解红细胞,直接进入第3步,。 2.2 加入10mL细胞染色buffer(或含1%BSA
科镊子提起腹膜,用 5mL 注射器往小鼠腹腔注射 2.5mL 预冷 PBS(勿扎到脏器),轻揉小鼠腹部1~2 min。注射器回抽腹腔灌洗液,收集于15mL 离心管中。 重复第 5 步 5 次,冲洗腹腔,可观察到冲洗液逐渐澄清。 将收集的腹腔灌洗液 300 g 离心 5 min,弃上清。 用细胞染色缓冲液或者含 10% 胎牛血清的 1640 培养液重悬细胞。 进行细胞计数,并调整细胞浓度至 1×107/mL。 注意事项: 若第 7 步离心弃上清后发现细胞沉淀中有较多红细胞,且检测目的细胞非红细胞,先
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