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南京森贝伽生物科技有限公司
DEAE-葡聚糖凝胶 A-50南京森贝伽生物科技有限公司专业供应,如琼脂糖凝胶系列、离子交换层析填料系列、疏水层析填料系列、亲和层析填料系列等,我司为您提供DEAE-葡聚糖凝胶 A-50售前、售中、售后服务,欢迎您来电咨询订购此产品。
产品名称:DEAE-葡聚糖凝胶 A-50
其他名称:二乙氨基乙基交联葡聚糖凝胶A-50;葡聚糖凝胶DEAE-A50
Type of ion exchanger:Weak anion
Total ionic capacity(mmol/g dry powder):3~4
Available capacity(mg/ml avained gel):
①thyroglobulin(MW669000):2
DEAE葡聚糖凝胶A-50②HSA(MW68000):110
③α-lactalbumin(MW14300):50
Bead structure:Cross-linked dextran
Dry particle size range:40~120um
Max operating linear flow rate:45cm/h at 25℃;HR 16/10 column;5cm bed height
pH working range:2~9
pH stability:long term and short term 2~12
Chemical stability:Stable to all commonly used aqueous buffers and additives such as 8 M urea and 6 M guanidine hydrochloride
Physical stability:Volume changes due to changes in pH or ionic strength
性状(以下信息仅供参考):阴离子交换剂。
规格:BR
单位:瓶
运输方式:快递(南京地区专门快递送货上门)
注:本产品仅供科研使用!
本产品现货,详细信息可联系以销售提供为准。
价格公道、量大从优、质量有保证
DEAE-葡聚糖凝胶 A-50使用方法分类:
1.乙醇浸泡:在室温下,将干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小时,并不断搅拌以保证凝胶溶胀,用无盐水洗去残存的乙醇滤干;
2.无盐水浸泡:室温下,在无盐水中充分溶胀24小时,间隙搅拌,以保证凝胶的完全溶胀,然后;
3.盐酸浸泡:在常温下再用0.2NHCl浸泡12小时,间隙搅拌,滤干,水洗只中性;
4.将溶胀好的凝胶脱气后(真空抽滤或超声波)根据装柱要求一次性置入柱内,注意保持湿态装柱,并避免柱内产生气泡或断层;
5.上样前平衡层析柱至少3-5个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值);
6.凝胶过滤的上样量一般为5%的柱床体积,我们建议初次上样控制在1-2%的床体积,视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积,柱高的选择也与分离要求相关,柱高控制在40-50cm以下,过高的凝胶层会引起较大的反压,应当尽可能避免。难分离物质要有一定柱高和流速控制,脱盐时高径比为5:1即可;
7.洗脱方法:可以用无盐水,也可以采用上柱时的缓冲液洗脱;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以完全分离纯化;
8.在位清洗(CIP)凝胶使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是以
40cm/h用1M氢氧化钠反向洗四个柱体积,再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。
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文献和实验DEAE-葡聚糖介导的转染,其原理还不清楚,可能是通过内吞噬作用而使DNA转导进入细胞核,此法只适合暂时转染实验,转染效率与DEAE-葡聚糖浓度以及细胞与DNA/DEAE-葡聚糖混合液接触时间的长短很有关系,可采用较高浓度的DEAE-葡聚糖(1g/L)作用较短时间(30分钟-1.5小时),又可用较低浓度(250g/L)的DEAE-葡聚糖作用较长时间(8小时)。 方法如下: 1. 接种鼠L成纤维细胞浓度为5×105CO2 /孔/皿生长2~3天,当达50%板底面积可用。
1. 接种鼠L成纤维细胞浓度为5×105CO2 /孔/皿生长2~3天,当达50%板底面积可用。 2. 乙醇沉淀的4μg的PSV2-neo质粒 DNA,空气干燥后溶于40μL的TE中,或取供体DNA。 3. 用10ml 1×PBS 、4mL、10%富合生长因子血清的DMEM洗板(皿)。 4. 在80μl热的10g/L DEAE-葡聚糖中缓慢加入DNA,取120μL DNA/DEAE-葡聚糖加到每孔(皿)细胞中,使其分布均匀轻轻转动直到显示均匀
G-25 (Sephadex-G-25) 【 实验操作 】 1.实验凝胶的制备:商品凝胶是干燥的颗粒,使用时需经溶胀处理,称取4克葡聚糖凝胶G—25,加50毫升蒸馏水,搅拌均匀,在室温溶胀6小时,或沸水浴溶胀 2小时,一般采用后一种方法。再用倾泻法除去凝胶上层水及细小颗粒,用蒸馏水反复洗涤几次,再以缓冲溶液(pH7.0的Tris—醋酸溶液)洗涤2—3次,使pH和离子强度达到平衡,最后抽去溶液及凝胶颗粒内部气泡,凝胶可保存在缓冲液内。 2.装柱
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