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鼎国
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250ml
原编号:NEW浓度:------保存:4℃产品简述:RNA提取时候,用于分离DNA与RNA。在酸性pH低于5.2时,DNA 会被变性并被分配到有机相和中间相,只剩 RNA 存在于水相。
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文献和实验。3 酶切基因组 DNA 的纯化(1)将上述酶切产物中加入等体积的苯酚:氯仿:异戊醇(体积比 25: 24: 1),混匀后 12 000 rpm 离心 10 min,取上清。(2)加入等体积氯仿:异戊醇(体积比 24: 1),混匀,12 000 rpm 离心 10 min,取上清。(3)加入 1/10 体积的 3 mol/L NaAc(pH 5.2)、2 倍体积预冷的无水乙醇,12 000 rpm 离心 10 min,沉淀用 70% 乙醇漂洗 2 次后,风干。(4)用适量的 1×TE 溶解后于 –20
(一)试剂准备1. CSB缓冲液:42mM柠檬酸钠;0.83% N-lauryl sarcosine(十二烷基,N甲基甘氨酸钠);0.2 mM β-巯基乙醇。2. 变性液:异硫氰酸胍(终浓度 4 M)25g、CSB缓冲液 33ml,混合直至完全溶解,可在65℃助溶。4℃保存备用。3. 2 M乙酸钠:pH 4.0。4. 异丙醇5. 无水乙醇、70%乙醇6. 酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)7. DEPC H2O:100ml ddH2O中,加入DEPC 0.1ml,弃分振荡,37℃孵育过夜。15
ug/ml),在50℃水浴 间断震荡3.5-4小时。 2、15,000 rpm离心10min,取上清液,加等体积的酚抽提, 15,000rpm离心10min。 3、取上清液,再以酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)及氯仿抽提,15,000rpm离心10min。 4、取上清液,加入二倍体积的无水乙醇使DNA沉淀,离心,用70%的乙醇洗沉淀两次。 5、干燥后,溶解在50ul无菌TE(10mMTris, 0.1mM EDTA,PH8.0)中,-20℃储存备用。 本方法用于紫菜孢子
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