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鼎国昌盛
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100g
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文献和实验( m/V ) 聚乙烯吡咯烷酮(PVP ) 以去除多酸类化合物。这里列出我们常用的匀浆缓冲液的配方: 0.4 mol/L 甘露醇、5 mmol/L EGTA、50 mmol/L 焦磷酸钠- KOH (pH 7.8)、10 mmol/L 半胱氨酸,0.5% BSA 和 1% PVP- 40,适用于各种不同的组织。缓冲液可以使用前新鲜配制,也可以配好后贮存在 4°C 或 -20°C 条件下。匀浆后过滤可用平纹纱布或各种药用纱布。 2.3 清洗缓冲液 0.3 mol/L 甘露醇、10 mmol
防冻物质cryoprotectant,cryoprotectivesubstance
亦称防冻剂。在冻结条件下保持生物细胞的生活状态时,为减轻冻害所加到介质中的物质,称为防冻物质。一般常用者有甘油、乙二醇、二甲亚矾(DM- SO)、蔗糖、葡萄糖、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等。在野生动植物中,于越冬期大量贮存甘油、山梨糖醇、蔗糖、海藻糖等物质的也不少。
,0.5%DTT(二硫苏糖醇),2% Ampholine (Amersham Pharmacia Biotech Inc,pH3.5-10),6% Triton X-100],37℃温育30min,期间搅动几次,28度 (温度低,高浓度的尿素会让溶液结冰)16000 r/min离心15 min,离心力越大时间长一点越好!上清即可上样电泳。或者-70度保存六、植物根中蛋白质的抽取(1)sample,液氮研磨(2)装1.5 ml centrifuge 用tube(3)加 1M KH2PO4 K2HPO4 700μ
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