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- 技术资料
- 保存条件:
-20℃避光干燥保存,避免反复冻融
- 保质期:
有效期6个月
- 英文名:
LysoSensor Green DND-189
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- CAS号:
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- 规格:
50μl
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 储存 | 价格(元) |
| 40767ES50 | LysoSensor™ Green DND-189 溶酶体绿色荧光探针 | 50 μl | -20℃避光 | 425.00 |
LysoSensor®系列探针是主要对活细胞中的酸性区室(如溶酶体、顶体精子)动态合成和功能进行研究的一类荧光探针,该类探针的染色具有向酸性,可通过质子化作用在酸性细胞器内累积。该类探针的这种质子化作用还可解除染料的荧光淬灭性,使其所发射的荧光强度更强。因此,与LysoTracker系列探针相比,LysoSensor®系列探针随着细胞器的酸化程度其荧光强度呈pH依赖型(向酸)增强。
本品LysoSensor™ Green DND-189具有较低的pKa值,仅在酸性区室内才具有荧光。本品以溶于无水DMSO的1 mM储存液形式提供。
如对活细胞中的酸性区室进行选择性标记和染色,可选择LysoTracker®系列探针。
产品性质
| 分子式(Molecular Formula) | C24H22N4O2 |
| 分子量(Molecular Weight) | 398.46 |
| Ex/Em | 443⁄505 |
| pKa | ~5.2 |
| 颜色(Color) | 绿色 |
| 结构式(Structure) | |
冰袋运输。-20℃避光干燥保存,避免反复冻融,有效期6个月。
注意事项
1)不能储存在无霜冰箱,建议按照单次用量分装于-20℃冻存。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。最佳工作浓度需根据不同的实验要求、细胞类型、细胞或组织的膜通透性等进行优化。
1. 工作液的配制
利用培养基或合适的缓冲液将1 mM 储存液稀释至工作浓度,推荐工作液浓度至少为1 µM;
【注1】:为了降低探针加载过度可能引起的假阳性,建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。2)若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育,会观察到荧光信号的衰减和细胞的空泡化现象。
【注2】:工作液现配现用。
2. 染色
2.1 对于贴壁细胞
1)将细胞置于培养皿中的盖玻片上,加入合适培养基,使其爬片生长。
2)待细胞生长到合适丰度,吸除培养液,加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育30 min~2 h(具体孵育时间需根据细胞类型而定)。
3)利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜(含合适滤片)下观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或延长染色时间。
2.2 对于悬浮细胞
1)离心,吸除上清。
2)利用37℃预热的探针工作液重悬细胞,于生长状态下孵育30 min~2 h(具体时间需根据细胞类型而定)。
3)离心,吸除染色液,加入新鲜培养液重悬细胞。
4)置于荧光镜下观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或加长染色时间。
【注】:对于悬浮细胞,也可将细胞贴附于经BD Cell-Tak处理过的盖玻片上,然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。
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文献和实验Vybrant® DyeCycle Green and Orange Stains
Stability Vybrant® DyeCycle™ Green stain Vybrant® DyeCycle™ Orange stain 400 μL 5 mM solution in dimethyl sulfoxide (DMSO
指除硫化氢、胶体状硫黄和硫代硫酸盐外,还利用分子态氢作为电子供体进行厌氧的光合作用的绿色光合细菌。专靠光合作用即可生活,完全不要求其他生长因子。该细菌生活在池水中。相当于伯杰氏分类系统中的绿菌科( Chlotobiaceae),有 5属,包括绿菌属( Chlorobium)和绿假单胞菌属( Chloro- pseudomonas)。绿菌属是大致如下式所示光合过程的自养性生物(无机营养生物),主要同化碳素作为光合作用无机营养源的自养性而生活( HCHO以糖为例的有机物)。很少
(3) 在常规用酒精沉淀核酸的过程中,SUPER Green Ⅰ可以全部从双链核酸上去掉。 (4) 如果想对用 SUPER Green Ⅰ染过的胶进行 Southern blots,建议在预杂化和杂化溶液中加入 0.1%~0.3% 的SDS。 (5) 在紫外照射透视下,与双链 DNA 接合的 SUPER Green Ⅰ呈现绿色荧光。如果胶中含有单链 DNA 则颜色为橘黄而不是绿色。 (6) SUPER Green Ⅰ对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用






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