碘化丙啶

碘化丙啶染色

碘化丙啶染色1．原理 碘化丙啶(propidium iodide，PI)不能穿人完整的活细胞膜中，即正常细胞和凋亡细胞在不固定的情况下对PI拒染，而坏死细胞由于失去膜的完整性，PI可进入细胞内与DNA结合，根据此特点，使用PI染色可鉴别死细胞。如果对活细胞染色必须在染色前进行固定，以增加细胞膜对染料的通透性。2．溶液配制 使用0．01mol／LPBS(pH 7．4)配制终浓度为0．5mg／ml的PI工作液。3．染色程序(1)单层细胞培养标本经预冷70％乙醇固定1小时，4℃；(2)0．01

关于PI（碘化丙啶）的讨论

组织中的细胞周期和凋亡检测方法之一－－PI法schoman无论是肿瘤或其它正常新鲜组织均可用PI（碘化丙啶）的方法来检测，这是一种常见而且便宜的方法。主要操作步骤如下：1、组织块用0.25%胰酶消化30min－1h。2、200－400目筛网过滤细胞，获得单细胞悬液。3、75％乙醇（－20度预冷）固定细胞1h。4、加入PI（终浓度50ug／ml）和无DNA酶污染的RNA酶（终浓度50ug／ml）1ml染色30min－1h。5、流式细胞仪检测细胞周期和凋亡。注意事项： 1、组织消化后使细胞

细胞的碘化丙啶染色用于FACS分析

FACS用于研究细胞组分DNA，碘化丙啶（PI）嵌入核酸双链中并可以发荧光。它不能进入活细胞，但是可以进入正在或者已经死亡的细胞。因此PI可以用于免疫荧光染色来鉴定死细胞。DNA染色可以用于研究细胞周期。相对的DNA含量可以坚持G1，G2和S期细胞的比例。在DNA染色中凋亡的细胞有特有的颜色。一、材料和试剂 1. TritonX-100（SigmaCatalogNo.T9284）2. 碘化丙啶（SigmaCatalogNo.P-4170）3. 乙醇 4. RNaseA